陈家锃：检测在非洲猪瘟防控中的科学应用

对于猪群普查的启动要以猪场的风险等级，猪群健康状况为参考依据，如当在外围出现多起车辆或人员检出阳性时或进出人员频次较大时，兽医团队可以针对猪群进行排查，辅助以猪栏、料槽等环境样本以便排查地更为彻底。随着非瘟潜伏期的延长，除了核酸检测外还可以结合抗体监测进行普查，抗体监测可每年监测2～3次；

4）对猪群尤其针对异常猪的日常监测，要常抓不懈。规模化猪场往往从妊娠母猪开始发病，针对妊娠母猪，只要发现剩料的，就要立即进行唾液或鼻拭子采样检测。针对育肥猪中的异常猪，出现精神状态不佳、拱料不食、喜卧的猪可通过唾液、鼻腔液或直肠拭子进行采样确诊。

（3）启动定点清除前先确定感染范围，可减少样本量

大多数猪场进行定点清除时，往往先对猪逐头检测后再对感染猪进行清除，这种操作方法在时间上滞后，人员操作存在交叉传播的风险。可先根据猪场猪舍分布，以单元格模式在各区域对异常猪和环境进行采样，先确定风险的区域后在此区域内再筛查，定点清除效率会更高。建议采取以下步骤进行操作：

1）发现阳性猪后，先按预定的清除路线将发病猪移出猪舍。剔除过程中可对剔除的每头猪进行采样，检测感染比例和病毒载量（此数据可作为对周边猪群处理或监测的依据）；

2）对送检不便的猪场，确诊后可以依据临床症状对易感猪和疑似猪进行淘汰（而不是等待检测结果出来再淘汰，以免延误战机）。在对减料不食的猪剔除过程中仍需对其进行采样，此数据可作为后续淘汰力度的依据；

3）以检出的阳性的猪栏为圆心，对周边栏的通道和栏杆进行环境检测，对区域内的异常猪只进行采样检测，从而确定有几栋猪舍发病和可能感染的危险区。对人员交叉情况进行分析，确定需监控的区域。在监控区内开展两个潜伏期的监测与排查，以相对静默的方式进行排查，减少猪群的应激；

4）在对风险区内猪只进行剔除时，按时间轴线绘制不同时间点的病毒载量和检出率的变化趋势，以便评价疫情控制的效果，从而及时调整消毒和管理方案；

5）猪群在两个潜伏期内未出现新的阳性个体后，仍需持续对环境样本（尤其是污水池等区域）监测一个月，以监督生物安全措施的落实，彻底清除猪场内的病原。

三、如何使检测结果更加可靠？

（1）采样流程培训和相关装备的配备是结果可靠的前提

除需对一线操作人员进行采样流程SOP培训之外，还需配备必要的采样工具、消毒和防护措施，从而降低交叉污染的概率。对于样本的保存可配置相关工具，例如唾液样本容易被降解，可配备冰盒、样品保存液、运输时配备专用的保温箱，都是保证结果可靠性的前提。采样过程中最好设置双人，专人记录、互相监督，保证采样的正确和信息的准确；

（2）以可靠样本进行确诊是启动定点清除的核心

确诊仍是第一要务，在此笔者并不是否认唾液或鼻拭子在提前发现传染源中的价值，但仅仅根据唾液或鼻拭子核酸呈弱阳性就启动定点清除或呈阴性就排除感染风险，笔者认为都是有待商榷的。因为无论是在采样过程还是检测环节，都存在误诊的可能，唾液或鼻拭子样本病原丰度不高在采样和运输过程中降解也是导致其不可靠的原因之一。

在猪场首次出现唾液或鼻拭子核酸阳性结果时，本着宁可信其有的观点，可以先对猪只进行隔离，并在2～3天后对这些猪只采集血拭子复查。采用血拭子检测的风险性相对较小，一方面非洲猪瘟感染早期不会出现凝血不良；另一方面，血拭子采集的方法出血量是可控的，不会造成大面积污染。病毒在血拭子中受外界干扰少、病毒载量高、更可靠；需要在隔离期内对猪舍做好相应的消毒措施； 

（3）养殖集团应建设标准化的中心实验室

荧光定量PCR非常敏感，容易受到气溶胶的污染，可靠的硬件设施是结果准确的保障。养殖集团可参照2010年农业部颁布的《兽医实验室生物安全要求通则》的要求建设实验室，其中PCR实验室应该由四分区组成，四分区有独立通风和空调系统，设定缓冲区和气压流向更有助于降低实验室上游污染的概率。养殖集团的中心实验室可作为仲裁机构，对结果进行最终的确认，并开展对体系内的区域实验室的盲评，有以便于建立更可靠的检测系统；

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