非洲猪瘟诊断技术研究进展（一）

曹深福等基于vp54蛋白作为包被抗原建立竞争ELISA方法，结果特异性达到100%，灵敏度达到96.22%，与西班牙IN GENASA试剂盒符合率为98.13%。但此方法不能诊断低毒力和高毒力菌株，因此对此类毒株检测要配合其他诊断方法。

2.2.2胶体金快速免疫层析法(gold-immunochromatography assay,  GICA)   GICA是近年来发展迅速的一项诊断技术。Beggs等首次用GICA测定人绒毛膜促性腺激素，该方法具有快速、灵敏、特异等优点，尤其适合临床的快速诊断。张鑫宇等建立的p54抗体检测胶体金免疫层析试纸，具有高度特异性，与猪其他病毒抗体阳性血清无交叉反应，在ASF防控中具有良好的应用前景。

2.2.3间接荧光抗体试验(indirect fluorescentanti-body test,  IFA) IFA是用荧光标记的二抗与抗原抗体复合物特异结合，最后在荧光显微镜下观察结果的一种方法。

2.2.4免疫印迹检测(immunoblotting test,IBT)   IBT是一种将蛋白质电泳技术和血清学结合的免疫生化技术，其特异性高，可检测出弱阳性样本。IBT可做为IFA诊断技术的替代方法。

2.3小结

血清学诊断是通过检测血清中的抗原或抗体来确定体内是否存有ASFV。此类诊断方法繁多，也很成熟，主要优缺点见表2。 FAT一般作为辅助性检测方法，当用于亚急性或慢性疾病检测时，其灵敏性不如ELISA或荧光定量PCR;  ELISA诊断技术虽然已经很成熟，但操作繁琐，要求较高；GICA, LFA检测迅速，但只能用于初步诊断，不能定量，适用于基层诊断；IBT成本较高，操作复杂，适用于实验室定性定量等专业测定。实际诊断运用中，常常联合应用多种诊断方法，各取所长。

3 展望

ASF是外来动物疫病，但已在全球流行近百年，一旦暴发便会对疫区造成灾难性打击。目前尚未研制出有效商业化疫苗，用于ASF早期预防，这就需要效率更高的诊断技术用于ASF排查。综上不难发现，病原学诊断和血清学诊断技术应用广泛，其中qPCR, RPA, GICA, LAMP等技术灵敏快速，近年来发展迅速，在ASF暴发前能起到高效排查作用，具有很好的发展前景。各种诊断方法虽很成熟，但各有优缺点，今后的发展趋势在于不同诊断技术的联合应用，如RPA-LFD、多重PCR联合自动电子芯片等。

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