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上兽研:非洲猪瘟检测与诊断技术要点(1.0版)

时间:2019-09-12    点击: 次    来源:中国农科院    作者:上海兽医研究所 - 小 + 大

样品信息至少应包括以下内容:

畜主姓名和养殖场地址;养殖场饲养动物品种及数量;疑似或被感染动物或易感动物种类及数量;首发病例和继发病例的日期;感染动物在畜群中的分布情况;死亡动物数、出现临床症状的动物数量及年龄;临床症状及其持续时间,死亡情况和时间等;饲养类型和标准,包括饲料来源等;送检样品清单和说明,包括病料种类、保存方法等;动物免疫和治疗史;送检者的姓名、地址、邮编、电话和邮箱;送检日期;采样人和被采样单位签章。

样品包装要求

采集好的样品应仔细进行包装,做好标记并送到实验室。样品应使用“三重包装系统”,保障运输过程中的生物安全,并避免样品受到污染。

推荐样品使用“三重包装系统”,并正确标记,以防止泄漏,内附采样单。

直接盛装容器。样品应该储存在密封、无菌的主容器中,根据检验样品性状及检验目的选择不同的容器,如图5所示。每个样品容器外应做好标记,注明样品名、样品编号、采样日期等,要能明确识别来自于哪只动物。


图5 B 类感染物质的包装标签和三重包装系统的例子

二次包装。吸收材料也应放置在二次容器内。如果将多个易碎的主容器放置在单个二次容器中,则必须单独包装或分离,以防止相互接触。二次包装容器应贴封条,封条上应有采样人签章,并注明贴封日期,标注放置方向。

坚硬的外部包装。外包装在盛装液体的情况下不得超过 4 升,在固体物质的情况下不得超过 4 公斤(不包括冰的重量)。样品必须保持 4℃温度或更低温度,并就近送动物疫病预防控制机构进行保存。注意:切勿冻结全血或混合有血凝块的血清。

外包装标签和标记:“B 类感染物质”标签,其正确的运输名称旁边标注“B 类感染物质”;采样负责人的全名、地址和电话号码;实验室联系人的全名、地址和电话号码;标签上标明“在4℃”、“在-20℃”或“在-80℃”保存。

3. 废弃物处理

采样结束后,做好尸体、场地、物品、个人防护用品的消毒和无害化处理。对不同场点尽量安排不同的采样人员,避免交叉污染。

四、实验室诊断与确诊

1.快速精准检测

实时荧光定量 PCR(qPCR)是实验室快速检测 ASFV 的常用方法。大型养猪企业可建设 ASFV 检测实验室,当猪场周边和自己猪场受到威胁时做好疫情排查与监测,为疫情处置和精准清除提供技术支撑。开展 qPCR 检测必须配备专用的实时荧光 PCR 仪和相应检测试剂。实验室可以根据技术标准开展 ASFV 的 qPCR检测。由于 qPCR 检测技术灵敏,极其微量的污染即可造成假阳性,对 PCR 实验室进行分区管理可以避免检测污染。应根据条件将 PCR 实验室分为试剂准备区、样本制备区、产物扩增区等。

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