陕西省榆林市口蹄疫免疫抗体检测

摘要：为评估陕西省榆林市 O 型、Asia I 型和 A 型口蹄疫的免疫抗体水平，比较单次免疫和加强免疫后的抗体水平和变化趋势，在陕西省榆林市采集 55 个规模场和 120 个散养户强制免疫后的猪、牛、羊血清共计 2 310份，用液相阻断 ELISA 法检测口蹄疫免疫抗体。结果显示：羊 O 型、Asia І 型，猪 O 型，牛 O 型、Asia I 型和A 型口蹄疫平均免疫抗体合格率分别为（57.12±4.8）%、（64.66±4.2）%、（66.46±2.02）%、（56±5.98）%、（57.9±1.66）% 和（64.29±4.26）%；规模场中，只有羊 Asia I 型和猪 O 型口蹄疫抗体合格率达到 70% 以上，而散养户的全部口蹄疫抗体合格率均低于 70%，差异极显著（P ≤ 0.01）；规模场首免 1 个月后进行加强免疫，发现抗体合格率全部由低于 70% 升高至 80% 以上，差异显著（P ≤ 0.01）。结果表明，榆林市的整体口蹄疫免疫效果较差，只有规模场的羊 Asia I 型和猪 O 型口蹄疫抗体合格率达到 70% 以上，因此需要对这些免疫不合格畜群进行加强免疫，只有这样方能实现有效的免疫保护。本研究为了解本地区口蹄疫免疫效果，以及免疫程序制定和进一步做好口蹄疫防控工作提供了参考。

关键词：口蹄疫；免疫抗体；猪；牛；羊；榆林市

口蹄疫（FMD）流行范围广，感染力强，四季均可发病，难以根除，对畜牧业影响极大。FMD 是我国强制免疫动物病种，疫苗免疫是控制和消灭 FMD 最有效的手段之一。全球范围内，许多国家或地区将疫苗免疫作为 FMD 防控的首选措施。已经研发成功的 FMD 疫苗种类主要包括常规灭活疫苗、基因工程疫苗、DNA 疫苗、合成肽疫苗、重组活载体疫苗、可饲疫苗等。目前，很多国家采用灭活疫苗进行 FMD 免疫预防。为做好 FMD防控工作，我国每年都要投入大量人力、财力实施FMD 强制免疫。同时，FMD 免疫后的监测工作也尤为重要。FMD 病毒免疫原性弱，加之受其他因素影响，临床常见免疫效果不理想甚至免疫失败的例子。

榆林市每年春秋各进行一次 FMD 强制免疫，对羊使用 O 和 Asia I 型二价疫苗免疫，对猪使用O 型单价疫苗免疫，对黄牛和肉牛使用 O 和 Asia I型二价疫苗免疫，对奶牛使用 O、Asia I 和 A 型三价疫苗免疫。通常，规模养殖场自主执行程序化免疫，散养户按国家强制免疫方案执行。为评估FMD 免疫后抗体水平，对陕西省榆林市 FMD 免疫效果进行实验室检测，并对单次免疫和加强免疫后 FMD 抗体水平和变化趋势进行分析，以期为制定科学规范免疫程序和进一步做好口蹄疫防控工作提供技术支持。

1 试验材料

1.1血清样品

血清样品采自榆林市 12 个县市区。2017 年11 月，根据每个县猪、牛、羊存栏量，随机选择1~2 个规模化羊场、1 个规模化猪场、1 个规模化牛场和 10 个散养户，每个规模场随机采集样品不少于 30 份，每个散养户不少于 3 份。共采集规模场羊血清样品 480 份、猪血清样品 450 份、牛血清样品 360 份，采集散养户羊血清样品 250 份、猪血清样品 185 份、牛血清样品 165 份。对采集的样品进行羊 O 型、羊 Asia I 型、猪 O 型、牛 O 型、牛Asia I 型和牛 A 型 FMD 免疫抗体检测。

2018 年 4—5 月，从所采样品规模场中，选择3 个羊场、2 个猪场和 2 个牛场进行加强免疫后抗体水平变化研究。每个场进行 2 次血样采集：第 1次于首免后 30 d 采集（同时进行第 2 次免疫），第 2 次于二免（加强免疫）后 30 d 采集，每场每次采集血样 30 份，共采集样品 420 份。所有血清样品按常规方法分离后，置 −20 ℃冷冻保存备用。

1.2 检测试剂

O、Asia I 型 FMD二价灭活疫苗： 批号17262010，金宇保灵生物药品有限公司生产；猪 O型 FMD 灭活疫苗：批号 20170305，必威安泰生物科技有限公司生产；O、A、Asia I 型 FMD 三价灭活疫苗：批号 1703026，天康生物股份有限公司生产；O 型 FMD 抗体液相阻断 ELISA 检测试剂盒：批号 2017090701、2018031201，兰州兽医研究所生产；Asia I 型 FMD 抗体液相阻断 ELISA 检测试剂盒：批号 2017090301、2018030901，兰州兽医研究所生产；A 型 FMD 抗体液相阻断 ELISA 检测试剂盒：批号 2017091601、2018031501，兰州兽医研究所生产。

1.3 仪器

超纯水机：型号 1810B，重庆摩尔水处理设备有限公司生产；普通离心机：型号 600A，北京白洋医疗器械有限公司生产；电热恒温培养箱：型号 DHP-9080B，北京白洋医疗器械有限公司生产；自动洗板机：型号 ELX50，美国伯腾（BioTe）仪器有限公司生产；微量振荡器：型号 ZW-A，金坛市科析仪器有限公司生产；FC 型酶标仪：型号DHP-9080B，赛默飞世尔（上海）仪器有限公司生产。

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