时间:2019-05-30 点击: 次 来源:PSY应用研究院 作者:杨有福 - 小 + 大
非洲猪瘟病毒,根据其致病力的不同,可分为高致病性、中等致病性和低致病性三类。高致病性毒株能造成严重的急性病症,并在感染后4-15天达到90-100%的死亡率;中等毒性的毒株死亡率在30-70%;低致病性毒株的死亡率在10-30%。 中低等级感染后存活下来的猪只是否长期带猪并向外界排毒,这是长期争论的焦点。德国弗里德里希·勒夫勒研究院诊断病毒所的研究人员给出了自己的实验结论。 一、实验设计 实验中,研究人员选取了36头非瘟病毒检测阴性、非瘟抗体检测阴性的5-6月猪,其中30头作为攻毒猪,用分离于荷兰的中等毒性的 Netherlands’86 毒株通过病毒培养上清液滴鼻的方式进行接种感染,称为C型猪。C型猪随机分为三组,每组10头,分别关在一个猪舍三个独立的大栏中。 剩余6头不接种病毒,用于在C型猪感染后期与其同栏饲养,检测感染后期C型猪的感染能力,称为S型猪。
感染后,C型猪每天检测直肠温度并观察临床现象。如果温度两天以上达到40度,则确认为发烧。临床观测症状包括:活泼度、耐受度、呼吸频率、步态、皮肤、眼睛、脸颊和采食量等,并建立评分系统。 为了评判感染后猪只病毒血症、排毒和免疫应答的程度,在感染第3,7,10,14,20,29,42,48,63和91天抽取前腔静脉血进行化验。 同一时间,为了检测感染猪只排毒情况,用棉签拭子收集包括粪便样品、唾液和口咽部样品在内的拭子样品,用作qPCR检测。从105天到126天,拭子样品每周收集一次。 99天后,幸存的19头C型猪与6头S型猪混养,每组放2头S型猪,并按原本实验设计收集各类检测样品。164/165天后,所有存活的C型猪和S型猪解剖采集组织样品检测,包括:扁桃体、唾液腺、脾脏、肺脏和下颌淋巴结,以及腹股沟、肝、肾、肠胃、肺等多处淋巴结。 所有拭子样品、血液样品和组织样品中病毒的都要用实时定量PCR检测,抗体用ELISA检测。为了检测血液和组织中有活性的病毒,应用血细胞吸附实验检测。 二、实验结果 1、临床症状 中等毒性的 Netherlands’86毒株感染后的C型猪表现出多种不同临床症状,包括急性致死、延迟致死、慢性病症,以及最终恢复等。 多数猪只在感染4-6天,出现发烧症状。在急性死亡的猪只身上,临床症状表现为萎靡不振、结膜炎、不采食、便秘、皮肤变红,特别在耳朵和眼睛区域;发烧41.8℃,一些猪在高烧5天后出现中枢神经障碍症状。急性症状平均持续8-10天。该阶段死亡的猪,解剖发现多个脏器出血:外周淋巴结肿胀和出血,肾脏出血点和肺部水肿。 |
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