规模化猪场仔猪腹泻病原的感染情况分析

在规模化猪场的养殖过程当中，仔猪腹泻是一种常见的疾病和状况。仔猪腹泻会带来严重的后果，在很大程度上降低养殖场的经济效益，并且仔猪腹泻的病原类型非常多，具有传染性，所以必须防止疾病的蔓延，从而做出准确的判断。通过实验表明，仔猪腹泻的病原主要分为大肠杆菌、胃肠炎病毒、猪轮状病毒以及猪流行性腹泻病毒。这四种不同的病原，分别对仔猪腹泻产生不同的影响。

1 使用材料以及具体方法

想要确诊规模化猪场仔猪腹泻几种不同病原的具体感染情况，就应该进行一定的实验。在实验过程当中，应该选择合理的材料，并且使用恰当的方法。对于材料的选择，应该对照大肠杆菌进行选购，并且准备好在实验过程当中所使用的试剂盒以及相关的工具和材料。

首先，应该对大肠杆菌进行分离纯化处理。应该通过具体的调查，明确规模化猪场仔猪腹泻的具体情况，并且选择典型的猪场进行调查和研究。可以采用收集仔猪腹泻的粪便样本，对这些样本进行处理，涂抹于培养基之上。并且保证这些样本的所处的环境，应该在37℃，进行培养，具体的培养时间是24小时。与此同时，应该选取红色的典型菌落进行培养，并且使用甘油进行保存。

其次，进行致病性大肠杆菌的鉴定工作。应该准备好反应的模板，将大肠杆菌进行分离处理，并且对照相应的菌种进行接种，平行放置。在37℃的环境之下，培养24个小时，并且使用清水进行洗涤。PCR检测工作应该针对大肠杆菌进行，并且设计相应的菌毛引物，使用相应的扩增方法进行实验。其中应该明确反映的具体体积，并且进行模板点样。反应程序具有一定的预变性，所以必须不断地变化温度和时间进行保存。这样才能够在具体的琼脂糖凝胶上进行电泳。另外，PCR检测仔猪水肿病大肠杆菌也是一项重要的工作内容。这种仔猪的大肠杆菌与两个毒力因子息息相关。这两个毒力因子分别为菌毛以及水肿毒素。不断地进行循环处理，在处理过程当中应该延伸和保存。

最后，上文已经提到规模化猪场仔猪腹泻的几种病原，其中分别为传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、流行性腹泻病毒等。对这几种病毒的感染情况进行调查和分析。就应该做好病料的处理工作。在采集样本之后，应该使用溶液进行稀释处理，并且将处理之后的溶液反复的动容，这样才能够做好离心处理工作。随后应该加入清液，再次离心，不断地收集清液，进行合理的保存。RNA的提取工作应该值得关注，使用相应的试剂盒进行提取，上文提到的样品应该加入试剂盒之内，在室温的条件之下，应该放置10min。随后将这种混合溶液进行转移，再次放置2min。在2min之后进行离心处理，离心处理的时间为1分钟。经过一系列的处理之后，应该丢弃流出的溶液，并且将残留RNA溶液进行收集。从而放入专业的离心管当中，放置2min之后进行反转录。

2 实验结果及分析

2.1 使用PCR鉴定致病性大肠杆菌

根据规模化猪场仔猪腹泻的几个不同的样本，进行实验和分析，并且分离出大肠杆菌，经过PCR的鉴定，扩增之后会形成凝胶电泳。结果显示，几个不同的规模化猪场仔猪腹泻病人感染当中，检测为阴性，与此同时，检测到的大肠杆菌以及只猪水肿病大肠杆菌，出现异常状况。所有的猪场当中，并没有发现并且明确大肠杆菌的条带以及水肿毒素条带。

2.2 使用RT-PCR鉴定猪轮状病毒

对猪轮状病毒进行RT-PCR鉴定工作，首先应该进行扩增产物的凝胶电泳处理，结果显示猪场当中检测到的特有条带，所以具有阳性性质。

2.3 使用RT-PCR鉴定传染性胃肠炎病毒以及流行性病毒

对猪传染性胃肠炎病毒以及猪流行性腹泻病毒进行RT—PCR的鉴定工作，结果显示，某个猪场当中检测到特有条带。另外其他的猪场当中经过检测可以发现有一种特有条带。这就说明这个猪场同时感染了两种不同的病原。而其他的猪场当中没有发现特有条带，因此具有一定的阳性率。

3 探讨

上文在实验检测过程当中，充分应用的PCR技术以及IRT-PCR技术，这两种方法受到一定的认可。与传统的实验室方法相比较，这两种方法具有一定的特殊性，反应灵敏迅速，并且能够直接检测到相关的样品。因此在对规模化猪场仔猪腹泻几种病原感染情况的调查过程当中，必须充分应用这两种专业检测技术。规模化猪场仔猪腹泻是一种常见的疾病，并且在寒冷季节容易发病。这病的原因大多数是病毒的感染。而引起规模化猪场仔猪腹泻的几种病原，也根据不同的地区，以及不同的时间存在较大的差异性。随着现代科学技术的不断发展，在猪场管理工作进行过程当中，不断地提高养殖技术，并且改善养殖的环境和条件。因此能够较好的控制相应的病毒。这种情况之下，病原检测工作一般不会检测到阳性。

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