五种不同种类消毒剂杀菌效果评估

摘要：为给父母代种鸡养殖场做好消毒工作提供一套理论数据，本研究选择5种消毒剂对鸡场采集细菌培养物消毒效果进行评估。将 3.1×107 CFU/ml 的细菌液与不同稀释倍数消毒剂分别反应30min、1h、3h、5h、10h、12h、24h，培养并计数反应后的菌落总数。结果表明，复方戊二醛溶液稀释至1000倍、火碱稀释至1%、10%聚维酮碘稀释至0.5%、过硫酸钾复合粉稀释至800倍、复方酚溶液稀释至600倍，反应30min杀菌率可达100%。该研究结果，结合5种消毒剂的成本和消毒机理可以选择合适的消毒方案。

鸡场消毒是做好生物安全措施最关键的一个环节，消毒效果好坏直接关系到场外微生物能否传入到鸡场，鸡场外消毒保证场外病原进入鸡场机会大大降低，鸡舍内消毒保证鸡舍内已经存在的病原微生物控制在一定范围内，不致引起疾病爆发。因此消毒是预防和控制畜禽传染病的重要措施之一。

由于市场上消毒剂种类繁多，消毒效果各异，如何选择适合自己养殖场的消毒剂是养殖场在生产过程经常遇到的一个实际问题。本研究拟通过定量杀菌试验比较过硫酸钾复合粉、复方酚溶液、复方戊二醛溶液、10%聚维酮碘、火碱对细菌的杀菌效果，并结合消毒剂的价格以及这5种消毒剂的消毒特点，进行综合分析，为养殖户筛选消毒剂提供参考。

1 材料和方法

1.1 材料

8.5%的生理盐水、营养肉汤（陆桥）、平板计数琼脂（陆桥）、过硫酸钾复合粉、复方酚溶液、复方戊二醛溶液、10%聚维酮碘、火碱（纯度99%）、棉签、18mm*180mm试管（带塞子）、250ml锥形瓶、100ul吸头、1ml吸头、10-100ul单道移液器、100-1000ul单道移液器、苏净牌超净工作台、一恒牌37℃恒温培养箱、酒精灯、申安牌高压灭菌锅等。

1.2方法

1.2.1 细菌的培养

使用灭菌棉签在种鸡养殖场的舍内墙壁上采集细菌，立即将棉签放入灭菌的营养肉汤中，放入37℃恒温培养箱中培养24h。

1.2.2 计算营养肉汤中的细菌的含量

室温条件下（25℃），将培养24h的肉汤在超净工作台中用灭菌的生理盐水进行10倍系列稀释，稀释到107倍。分别从104～107的稀释肉汤中，依次取0.1ml菌悬液，加入平板计数琼脂，摇匀，凝固后倒置放入37℃恒温培养箱培养24h，计数菌落总数。

1.2.3 五种消毒剂对细菌的杀菌效果

室温条件下（25℃），根据厂家推荐浓度设置消毒剂稀释比例（见表1）。将过硫酸钾复合粉、复方酚溶液、复方戊二醛溶液用蒸馏水分别进行1:200、1:400、1:600、1:800、1:1000倍稀释；10%聚维酮碘稀释至0.5%、1%、2%、4%、5%（以碘含量计算）；火碱稀释至1%、2%、4%、5%、6%。震荡混匀后，取系列稀释的不同种类的消毒剂与菌悬液按25:1（5ml消毒剂：0.2ml菌液）比例混合，经不同时间反应后（30min、1h、3h、5h、10h、12h、24h），将0.1ml的细菌消毒剂混合液加入灭菌平皿中，倒入灭菌平板计数琼脂，混匀，凝固后倒置放入37℃恒温培养箱培养24h，观察结果，计算菌落总数（整个处理过程在超净工作台中无菌进行）。实验过程中设置灭菌蒸馏水阳性对照（灭菌蒸馏水：菌悬液=25:1）和阴性对照（灭菌蒸馏水）。

表1 厂家推荐消毒剂使用浓度

2 结果

2.1 营养肉汤中细菌含量的结果

由表2计算出，菌悬液中含菌量3.1×107CFU/ml。

表2 菌悬液中细菌含量

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