河北省全株玉米青贮质量评定标准

A.3.2样品的检测

向每支试管中加入50μL正文中所述制备青贮浸出液，按检测步骤测定样本液的吸光度。

A.3.3水分测定

按 GB/T 6435的规定执行。

A.3.4总氮的检测

按 GB/T 6432的规定执行。

A.3.5结果计算

氨态氮的含量按以下公式进行计算。

式中：

X：氨态氮含量，单位为占总氮的质量百分比（总氮%）。

ρ：样液的浓度，单位为毫摩尔每升（mmol/L）。

D：样液的总稀释倍数。

M：样品的水分含量，单位为百分比（%）。

N：试样的总氮含量，单位为占鲜样的质量百分比（鲜样%）。

附录  B

（资料性附录）

液相色谱法测定青贮饲料有机酸含量

B.1试剂和材料

乳酸、乙酸、丙酸、丁酸标准品，超纯水，色谱纯高氯酸。

B.2仪器

高效液相色谱仪配备紫外检测器和工作站

B.3测定程序

B.3.1色谱条件

Shodex KC-811色谱柱，3mmol/L高氯酸为流动相，流速1mL/min，SPD检测器波长210nm，柱温 50℃，进样量 20μL。

B.3.2色谱测定

采用外标法，用乳酸、乙酸、丙酸、丁酸标准液制作标准工作曲线。根据试样浸提液中被测物含量情况，选定浓度相近的标准工作曲线，对标准工作溶液与试样浸提液等体积参插进样测定，标准工作溶液和试样浸提液乳酸、乙酸、丙酸、丁酸的响应值均应在仪器检测的线性范围内。按照色谱条件分析标准品，乳酸、乙酸、丙酸、丁酸的保留时间分别约为 8.1 min、9.6 min、11.2 min、13.8 min，标准品的液相色谱图见图 1。

B.3.3空白试验

将制备的玉米青贮饲料试样浸提液，通过   0.22μm微孔滤膜过滤后，采用高效液相色谱法测定乳酸、乙酸、丙酸和丁酸含量。

B.3.4结果计算

用色谱工作站计算试样浸提液被测物的含量，计算中扣除空白值。再通过换算浸提液   制备过程中对应的样品量，获得乳酸、乙酸、丙酸、丁酸在样品中的比例。

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