湖南作为一个养猪业大省，人均猪肉占有量、生猪岀栏量、年末生猪存栏量均居全国前列。湖南省养猪业规模虽然较大，但科学化水平仍处于发展中阶段，猪病依然是阻碍其畜牧业健康发展的主要问题之一。当前，湖南省猪病临床发病形势总体较为复杂，疾病种类较多。病毒性、细菌性、寄生虫、毒素中毒等疾病在湖南省均有出现。病毒性疾病种类最多，也最为常见，涉及的病原多达 12 种 。不但给养猪业造成巨大损失，而且还存在潜在的公共卫生问题 。目前，病原变异及临床混合感染等对猪群病毒性疫病的发生、流行产生了重大影响 。为了解湖南省猪病总体流行态势，研究猪病发生规律，对 2016 年实验室接诊的病例进行了统计分析， 以便为未来的猪病防控提供技术支持。
1、材料与方法
1.1 临床病例样品
2016 年湖南省 13 个市州 53 个县 96 个规模猪场主动送检的，来自 117 例临床病例的 385 份样品。样品类型包括血清、组织或粪便。病例来源于存栏量在 100~8 000 头之间的猪场，其中存栏 300~1 000 头的规模猪场送检病例 83 例，占总病例数的 70.9%。
1.2 主要试剂、耗材
病毒 RNA/DNA 提取试剂盒，购自苏州天隆生物科技股份公司；猪蓝耳病毒（PRRSV）、猪高致病性猪蓝耳病毒（HP-PRRSV）、猪瘟野毒 （CSFV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪圆环病毒 2 型（PCV2）、猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪细小病毒（PPV）、猪轮状病毒（PRVA）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）荧光定量 PCR 试剂盒，均购自北京世纪元亨动物防疫技术有限公司。其他常用试剂均为国产分析纯级产品。
1.3 病例定义和分析
以养殖场单次发病送检病例为 1 个病例，结合临床症状、流行病学情况，开展实验室检测，做 出该病例的诊断及病因分析。采用以月为单位进行病例数量统计的方式；以高热、呼吸道症状、繁殖 障碍、神经症状、腹泻症候等，分析病例的症候群分布；对公猪、母猪、哺乳仔猪、保育猪、育肥猪， 分阶段统计发病群体。
1.4 样品处理
将组织样品剪碎，取1~2 g放于2 mL离心管中，加入研磨钢珠后放于研磨机中研碎；加入适量 PBS （或同群猪血清）混匀，8 000 r/min 离心 2 min； 取上清用于下一步的核酸提取实验，将剩余样品于 -20 ℃冻存。对粪便样品中直接加入适量 PBS 混匀，经 8 000 r/min 离心 2 min 处理后，取上清进行样品检测实验。
1.5 检测方法
分别按照病毒 RNA/DNA 提取试剂盒和各检测病原的荧光定量 PCR 试剂盒说明书要求进行。
2、结果与分析
2.1 病例时间分布
对 2016 年的 117 例临床病例按月统计。结果显示：除年初 2 个月病例数较少外（可能受春节期 间送检积极性较低的影响），其余月份病例数相对平稳，但气温变化较大的 3、4、6、11 月份的病例 数相对较多（图 1）。  图1 临床病例发病时间分布
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