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一步法药敏试验在临床诊断上的应用

时间:2010-03-06    点击: 次    来源:阳光畜牧网    作者:阳光畜牧网 - 小 + 大

崔晨光,崔彦刚,邵素云
(河北省行唐县兽医防疫站化验室,河北行唐050600)

    1目的与意义
    药敏试验是动物疾病诊疗中非常有效的、投入少、回报高的一项实验室技术。通过药敏试验,确定病原菌,选择高敏的药物对疾病进行治疗,既缩短疗程、减少治疗费用、提高治愈率、降低患病畜禽的非正常淘汰率,又防止了盲目、长期和大量的使用抗生素,导致动物产品的药物残留。但是在兽医临床诊治过程中,养殖户由于害怕试验时间太长(按传统方法需48个小时),而耽误畜禽疾病的治疗,所以要按传统的试验去推广,养殖户很难接受,该试验就是针对这一实际情况开展的。
    2试验技术
    2.1试验针对的动物 主要为奶牛、禽类 。
    2.2试验针对的动物的疾病
    奶牛的乳房炎,禽类的大肠杆菌、沙门氏菌及巴氏杆菌等细菌性疾病。
    2.3细菌分离鉴定及药物敏感试验技术要点
    变过去传统的二步法合并为一步法,即将先进行细菌培养(24小时)再进行药物敏感试验(24小时)改为细菌培养和敏感试验同步进行(24小时),从而节约时间,抓住患病动物的最佳治疗时机,提高治愈率,降低治疗成本,提高经济效益。
    改过去的先准备大量的药敏片为不需药敏片,直接在接种的琼脂平板上打孔,加药于孔内,从而做到操作简便,选药用药方更快捷。
    2.3.1细菌的分离及接种
    无菌采集患病部位的病料。例如奶牛乳房炎,无菌采集患病乳区的乳汁10毫升,注入灭菌试管中, 2000转/分钟离心5分钟,以沉淀集菌;禽类的大肠杆菌、沙门氏菌(禽伤寒、副伤寒、白痢)、巴氏杆菌等病可无菌采集病死禽类的肝脏、脾、肾及肠道的分泌物。将采集处理好的病料接种于普通培养基或麦康凯培养基。
    2.3.2细菌的培养及敏感药物试验
    以直径3毫米的金属打孔器在接种好的琼脂平板上打孔,加药于孔内,(粉剂药需加满孔),并标记出青霉素、链霉素、庆大霉素、蒽诺沙星、环丙沙星等各种试验药物名称,然后置于37℃生化培养箱中培养。培养24小时后取出,并观察记录,分析结果。根据各洞周围有无抑菌圈及其抑菌圈直径大小,判定病原菌对各种试验药物的敏感度。抑菌圈直径大于15毫米为高度敏感,10~15毫米为中度敏感,小于10毫米为低度敏感。试验时一定要建立“无抗生素操作的观念”。若培养基污染抗生素时则可发生无抑菌圈现象,因此在配制培养基、缓冲液时一定要防止污染抗生素。
    2.4用药原则
    2.4.1根据做出的药敏试验结果,选择高度敏感的药物作为首选药,在选择高敏药物时要考虑到药物的吸收途径。因为药敏试验是药物和细菌接触,而在给畜禽用药时,必须通过机体的吸收才能使药物发挥疗效,所以在给畜禽投药时,可以多用几种高度敏感的药物使其能够协同作用,但必须注意要投以足够剂量、足够疗程的药物,才会取得好的治疗效果,同时注意药物间的配伍禁忌。
    2.4.2选用的药物要残留小,副作用小,不影响家畜怀胎和禽类产蛋率。能尽量用中成药就不用西药,能用价廉药就不用高价的新特药,以防产生新的耐药性。

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