1、发病情况及临床症状 2015年11月份,湖南省株洲市某规模化养猪场保育猪暴发了呼吸道疾病综合征。仔猪体温升高至40 ℃,呼吸困难,咳嗽不断,精神不振,共济失调,食欲减退,猪只消瘦,腹部皮肤发紫,耳尖部坏死变黑,部分猪只腹泻。每天有数头仔猪死亡。发病后猪场采用氟苯尼考、多西环素和支原净综合治疗,猪群病情得到缓和,死亡减少。 2 、病理剖检 对病死猪进行病理剖检,其结果如下:前后肢关节肿大,切开后关节腔有大量黄色液体流出;颅腔切开后发现脑组织有炎症;胸腔积液很多,肺部纤维素化严重,粘在胸腔壁上面,心包膜发生炎症(如图1);肾有点状出血;全身淋巴结肿大,充血。 图1 病死猪剖检 注:A.治疗前胸腔积液;B.治疗前胸腔纤维素化。 3 、实验室检测与结果 3.1病原菌PCR检测 取病死猪的肝、肺、肾、淋巴结等处的组织病料,采用TSB接病料,培养细菌,采用菌液提取总DNA,应用本实验室建立的巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌、李氏杆菌、猪链球菌、支原体PCR诊断方法检测巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌、李氏杆菌、猪链球菌、支原体。琼脂糖电泳结果表明,仅猪链球菌和猪李氏杆菌被检测出目的条带(如图2,3) 其他病原体无检测结果,结合图1,2说明存在猪链球菌和李氏杆菌混合感染。 猪链球菌检测结果 注:37-41为链球菌16S(XXN-211-FP与XNN-212-RP)产物,退火温度为56 ℃, 目的条带长度为300 bp(其中39为阴性,其他为阳性);42-44为链球菌CPS(XNN-213-FP与XNN-214-RP)产物,退火温度为55 ℃,目的条带长度为480 bp(其中42为阳性,43和44为阴性)。
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