(3)免疫酶法(包括免疫酶组织化学染色法和免疫过氧化物酶细胞单层试验),用途为检测组织、细胞培养物中病毒抗原; (4)兔体交叉免疫试验,用以检测是否含有猪瘟病毒的定性依据; (5)中和试验,用已知阳性血清检测病毒,金标准方法; (6)ELISA方法(猪瘟单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验),用已知阳性血清检测病毒抗原; (7)RT-PCR(含荧光RT-PCR),用途为检测病毒核酸; (8)核酸序列测定,解析病毒核酸 检测抗体方法: (1)正向间接血凝试验(IHA),用已知血凝抗原检测特异抗体; (2)中和试验,用已知病毒检测血清,金标准方法; (3)ELISA方法(猪瘟病毒抗原酶联免疫吸附试验),用已知病毒抗原检测特异抗体。 481、禽流感抗原微量血凝试验,反应板孔内最终体积为75微升,试验中所用PBS的PH值为7.2,浓度为0.01mol/L。 482、布鲁氏菌病的常规实验室检测方法: 筛选检测时用琥红平板凝集试验或全乳环状凝集试验,阳性样品再用试管凝集反应或补体结合试验进行复核。 琥红平板凝集试验阳性或全乳环状试验阳性但试管凝集试验阴性,不可以判定未免疫动物感染布布鲁氏菌病;试管凝集试验阳性或补体结合试验阳性,可以判定未免疫动物感染布布鲁氏菌病。 483、布鲁氏菌病的试管凝集试验的判定标准: (1)牛、马、鹿和骆驼1:100血清稀释,猪、山羊、绵羊和狗1:50血清稀释,出现“++”以上凝集现象时,受检血清判定为阳性。 (2)牛、马、鹿、骆驼1:50血清稀释,猪、山羊、绵羊、狗1:25血清稀释,出现“++”以上凝集现象时,受检血清判定为可疑反应。 (3)可疑反应家畜经3-4周后重检,如果仍为可疑,该牛、羊判为阳性。猪和马经重检仍保持可疑水平,而农场的牲畜没有临床症状和大批阳性患畜出现,该畜被判为阴性。 484、口蹄疫正向间接血凝,以呈现50%凝集“++”的最大稀释倍数为该份血清的抗体效价。 485、牛型结核分枝杆菌PPD皮内变态反应检测方法及判定标准: 在牛颈侧中上部1/3处剃毛,直径约1cm,用游标卡尺测量术部中央皮皱厚度,作好记录,然后用酒精棉消毒,皮内注射0.1mL,于72h后进行观察、测量,接种部位。局部有明显的炎性反应,皮厚差大于或等于4.0mm的为阳性;皮厚差在2.1-3.9mm为可疑;无炎性反应,皮厚差在2mm以下判为阴性。既使皮厚差小于2mm,但有一定的炎性反应,也应判为可疑。 对于阴性和可疑反应牛,应在注射后96h和120h再分别观察一次,以防出现迟发性变态反应。对于可疑反应牛,过60d后进行复测,连续两次检测仍为可疑或阳性的,视为阳性牛。 486、口蹄疫O型正向间接血凝试验共设3个对照: 阴性对照、阳性对照 、稀释液对照。 487、亚Ⅰ型口蹄疫液相阻断ELISA试验共设3个对照: 病毒抗原对照 、阳性血清对照 、阴性血清对照。 488、《高致病性禽流感防治技术规范》规定的血凝抑制试验成立条件及判定标准: (1)只有阴性对照孔血清滴度不大于2log2,阳性对照孔血清误差不超过1个滴度,试验结果才有效。 (2)HI价小于或等于2 log2判定HI试验阴性;HI价等于3 log2 为可疑,需重复试验;HI价大于或等于4 log2为阳性。
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