自从1994年我国大陆首次从鸡体内分离出H9亚型禽流感病毒以来,该亚型病毒开始在我国鸡群内蔓延。由于H9亚型禽流感感染后引起鸡的免疫应答水平降低,机体抵抗力下降,常并发或继发细菌、病毒混合感染,临床多见与大肠杆菌混合感染,导致发病率与致死率升高。2014年12月24日,华北检测中心接到河北省涿州市一例产蛋鸡发病的案例。经流行病学调查、病理剖检和实验室诊断,最后确诊为一起禽流感H9继发大肠杆菌感染的病例。 1、临床症状:5000只160天的产蛋鸡,产蛋率80%左右,有轻微下降,无腹泻现象,采食量没有变化,只是总是出现死鸡,最高峰时日死亡30只,平均每天死10只左右,使用头孢等抗生素未见好转,病情已有10天左右。 2、病理剖检:剖检发病鸡,包心、包肝严重,卵泡液化呈菜花状;腺胃肿大,十二指肠、空肠、回肠淋巴结肿大出血;输卵管萎缩内可见清亮粘液,脾脏肿大。肺脏、气管等未见明显病理变化。(见附图) 3、实验室诊断 3.1 新城疫、禽流感抗原检测 无菌采取肝脏、心脏、输卵管内容物等病变组织,将上述组织研磨后做分子生物学检测,分别检测新城疫、禽流感(H9)抗原、禽流感(H5)抗原,结果显示禽流感(H9)为阳性;新城疫、禽流感(H5)为阴性,说明机体内可能存在禽流感(H9)病毒,如图1。 图1 新城疫、禽流感抗原检测结果 注:M为 DL2000 DNA Marker。 1为新城疫抗原检测结果为阴性;2为禽流感H5N1抗原检测结果为阴性;3为禽流感H5N2抗原检测结果为阴性;4为禽流感H9抗原检测结果为阳性,即从病料中检测出H9病毒。 3.2 细菌分离鉴定 无菌采取心、肝、脾等病变组织,将上述组织分别接种麦康凯和SS培养基平板上,37℃培养24h后观察结果,在麦康凯培养基上发现了大量粉红色、外表光泽、圆润的菌落;在SS培养基上未发现菌落;经鉴定为在麦康凯培养基上生长为大肠杆菌,如图2。
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