3 分子生物学检测 (1)从处理样品中,采用试剂盒提取RNA,设计I亚群C-4型腺病毒(Hexon蛋白)引物,利用一步法进行PCR检测,1%琼脂糖凝胶电泳,成像系统显示待检样品中含有I亚群C-4型腺病毒(Hexon蛋白)目的性基因片段(见图3)。 图3 琼脂糖凝胶电泳 (2)测序分析 对待检样品的PCR产物送大连宝生物进行基因测序分析(见图4)。 图4 核苷酸同源性 4 结论 (1)送检样品通过病毒分离没有检测到有血凝性的病毒。 (2)送检样品通过AGP试验:待检样品与IBH-I亚群阳性血清出现明显的沉淀线。 (3)送检样品通过RT-PCR检测出现I亚群C-4型的目的性基因片段,经测序分析为I亚群-C-4型腺病毒。 四 发病原因 1 心包积液发病原因较为复杂。如1987年在巴基斯坦的肉鸡发生该病的原因是活疫苗污染。很多学者证实腺病毒在健康鸡群中的感染和分离较为普遍,但与其它疾病混合感染时才会导致鸡群发病,如感染了法氏囊病、传染性贫血或饲喂了霉变饲料。 2 鸡群感染I亚群C-4型腺病毒,目前还没有有力证据证明该病的发病规律和发病原因,还需要在流行病学和病原检测方面进一步努力。 3 应对发病鸡场和该病流行地区使用的活疫苗进行调查和检测外源病毒,来确定是否与免疫活疫苗有关。 五 防治 1 鸡群应做好免疫抑制性疾病的防控,如法氏囊病传染性贫血、网状内皮增生症、霉菌毒素等诱因均可与腺病毒发生协同感染。 2 建议从腺病毒检测阴性的种鸡场进雏鸡。 3 在活疫苗的选择方面要慎重,避免使用污染其它病原的活疫苗。 4 发病鸡群无特效药物,可增加营养以增强体质,添加适量抗生素防继发感染。死亡率高的鸡群可以注射特异性卵黄抗体或血清。
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