四种奶牛结核病检测方法的比较研究

时间：2015-01-15 点击：次来源：阳光畜牧网作者：王楠、王作友等 - 小 + 大

   2.5 判定标准
    2.5.1 中国国家标准：阳性反应，局部有明显的炎性反应，皮厚差大于或等于4 mm。可疑反应，局部炎性反应不明显：皮厚差大于或等于2.0mm，小于4.0mm。阴性反应，无炎性反应，皮厚差在2.0 mm以下。凡判定为疑似反应的牛只与第一次检验 60d后进行复检，其结果仍为疑似反应时，经60d 再复检，如仍为疑似反应，应判为阳性。
    2.5.2 欧盟比较皮内变态反应试验判定标准：如果牛PPD反应阳性，且比禽PPD反应大4 mm以上，则认为是阳性反应。如果牛型PPD反应是阳性，并且牛型PPD反应仅比禽型PPD反应多1～4mm，则判为可疑。如果牛型 PPD 反应是阳性或阴性，但其反应等于或小于禽反应，则认为该反应是阴性。
    2.5.3 牛γ干扰素酶联免疫吸附试验判定标准：在判定结果前必须检查对照样品结果，确定阴性对照和阳性对照的平均OD值。可接受的平均OD值范围：牛γ干扰素阴性对照<0.130（注：各阴性对照重复孔差值不能大于 0.040）；牛γ干扰素阳性对照>0.700（注：阳性对照重复孔OD值的变化幅度不超过其平均OD值的30％）若有一项不符合,试验无效，须重新检测。
    阳性=牛型提纯结核菌素的OD-阴性抗原的OD≥0.1 且牛型提纯结核菌素的 OD-禽型提纯结核菌素的OD≥0.1
    阴性=牛型提纯结核菌素的OD-阴性抗原的OD<0.1 或牛型提纯结核菌素的 OD-禽型提纯结核菌素的OD<0.1
    2.5.4 牛结核分枝杆菌免疫胶体金试验判定标准：对照线和检测线均显示紫红色线为阳性，仅有一条紫红色对照线为阴性。
    3 结果
    3.1 在被检100头牛中，采用牛结核菌素皮内变态反应国家标准判定牛结核病阳性数为36头，采用欧盟判定标准判定牛结核病阳性数为13头。欧盟比较皮内变态反应检测阳性牛只全部在牛结核菌素皮内变态反应国家标准判定的阳性牛只中。
    3.2 在被检100头牛的抗凝全血培养上清中，BOVIGAM γ干扰素检测试剂盒检测阳性数12头，自制Rv3872/CFP-10/ESAT-6 融合蛋白试剂盒检测阳性数10头。两种γ干扰素检测阳性牛只全部在牛结核变态反应阳性牛只中，而禽结核γ干扰素检测阳性牛只全部在禽结核变态反应阳性牛只中。
    3.3 在被检100头牛的血清中，两种牛结核抗体快速检测试纸条检测阳性分别为11头和9头。其中各有1头既不在γ干扰素检测阳性牛只中，也不在皮内变态反应检测阳性牛只中。
    4 讨论
    4.1 传统的牛型PPD法由于结核菌素含有与卡介苗及与环境分枝杆菌相同的非特异性抗原组分，检测时容易出现假阳性，且对感染后期的开放性结核及全身性结核不敏感，容易造成漏检。
    本试验中国标方法和欧盟比较皮内变态反应检测法结果之间的差异就可能是环境分枝杆菌造成的。
    4.2 欧盟比较皮内变态反应检测法是对传统的牛型PPD法的改进，主要是能够区别被检动物是由牛型分枝杆菌感染还是由其它非典型分枝杆菌感染，从而排除由禽结核分枝杆菌干扰所致的非特异性反应，避免使许多非结核牛被误判为结核牛，造成不应有的损失。
    4.3 γ干扰素检测法固有的描述灵活性是其检测性能适应根除结核这一必须任务的最大优点，其灵敏性和特异性还可以调整到更高。γ干扰素检测特有的高灵敏性意味着该方法在肺结核肆虐时或肺结核传播非常快且大量动物需要检测时是最理想的方法。
    4.4 免疫胶体金法是近20年发展起来的一项免疫学检测技术，该技术不仅特异性强、敏感性高，而且不需昂贵仪器设备，操作简单快速，适合基层兽医对牛结核病进行普查和检疫, 也可以作为皮内变态反应的辅助诊断方法，具有良好的应用前景。
    参考文献(略)

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