何辉(北京爱德士元亨生物科技有限公司,北京100029) 摘要:禽白血病是目前对我国养禽业尤其是种禽业造成重要经济影响的疾病。本文概括分析了禽白血病的检测方法、净化原则以及净化管理,并对该净化程序的实施效果进行评估与优化。 关键词:禽白血病;净化程序;评估 禽白血病的发生,对我国家禽产业造成了严重的经济影响。一般情况下,禽白血病可造成成年鸡死亡率和肿瘤增加、产蛋下降及饲料消耗上升;造成青年鸡群体均匀度下降、体重下降、死亡率和饲料消耗上升;育种群感染会影响商品雏鸡质量,导致客户满意度下降,或发生相关投诉或诉讼;SPF鸡感染会造成疫苗污染,带来的风险更为严峻。因此,开展禽白血病净化工作显得尤为迫切和重要。 1 世界重要育种公司J亚群禽白血病的净化 从1988年开始,就有育种公司开始开展禽白血病净化工作,由于最初没有很好的净化方法,净化工作进展缓慢,直到2000年左右开始有公司完成净化工作。之后,随着禽白血病检测试剂盒的开发和科技进步,完成净化所需时间越来越短。 2 禽白血病的主要传染方式 禽白血病主要通过以下几个途径进行传播,即通过生殖道(体细胞)发生的先天传播;通过遗传性(种系)发生的垂直传播;通过紧密接触(分泌物、排泄物、血液)发生的水平传播;通过污染疫苗发生的外源性传播。 3 禽白血病在不同性别鸡群的传播和感染率 通过对感染禽白血病病毒的228只平养公鸡和228只平养母鸡群体不加控制,定期进行禽白血病检测,检测结果呈现以下特点:开始几周阳性率很低,6~9周龄达到高峰,最高阳性率达50%,之后开始下降并保持在一定水平。因此,无论是从兽医角度还是育种角度出发,对禽白血病的检测控制都越早越好。因为,12周龄以后内源性病毒开始表达,后期的检测结果越来越难以解释。后期禽白血病阳性率的降低,并非病毒被杀死,而是病毒刺激机体产生抗体并中和一定比例的病毒。 4 禽白血病的检测方法 禽白血病检测主要有3种方法,即通过胎粪、泄殖腔或阴道拭子、蛋清和病毒培养物进行抗原捕获ELISA检测;A、B亚群和J亚群ELISA抗体检测;病毒分离检测。 4.1 抗原捕获ELISA在胎粪检测上的应用 该方法具有实用(在孵化室即可快速得到结果)、有效(可作为快速降低ALV感染的基础)、廉价(费用大大低于病毒分离)、易于操作(实验室人员不难培训,容易获得技术支持)等优点。在检测中,假阳性可通过重新检测解决,假阴性可通过小群孵化进一步排除。由于在孵化时内源性禽白血病病毒表达较少,检测结果不需太多解释。利用该方法,如净化有效,可使阳性率降到1%以下。 4.2 抗原捕获ELISA在蛋清检测上的应用 该方法也具有有效、实用、廉价、易于操作等优点。但检测时需了解每个遗传系和鸡群年龄范围的基准线。由于内源性病毒特异性抗原的存在,慢羽品系和一些快羽品系可能产生大量假阳性结果。因此,必须在蛋清特异性抗原基准线建立后对检测方法做相应的内部修正。对检测结果需做进一步解释,可通过病毒分离进行支持。 对于蛋清的选择,有研究结果表明内层的稠蛋清病毒含量可能更高,但从可操作性方面,外层稀蛋清更易于实验室操作处理。 5 净化原则 主要包括以下几项原则:早期检测,越早检测越容易对检测结果进行解释;进行多次检测,一次检测结果难以分辨内源性病毒和外源性病毒;病毒分离是金标准;p27抗原的ELISA检测是所有计划的核心,因为所有的ALV都具有相同的p27抗原。
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