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猪场主要猪病抗体水平监测及免疫效果分析

时间:2014-04-27    点击: 次    来源:阳光畜牧网    作者:阳光畜牧网 - 小 + 大

    近年来,由于多方面的原因,养猪业疫病控制面临着严峻的挑战,猪群的密度越来越大,猪的抵抗力逐步降低,导致猪病越来越错综复杂,给诊断和防制带来很多困扰。为了摸清规模猪场中猪瘟抗体水平和免疫状况,猪伪狂犬病、猪蓝耳病阳性率和分布情况,有重点地开展相应的免疫预防,我们检测了永州市24个规模猪场911份血清中的猪瘟、猪伪狂犬及猪蓝耳病抗体,现报道如下。
    一、材料和方法
    随机取样 采自永州地区24个规模养猪场(未经猪伪狂犬病及猪蓝耳病疫苗免疫),其中母猪血清621份,肥育猪207份,种猪(此处专指种公猪,以下同)83份,血清分离后置冰箱21℃保存备用。
    材料 猪瘟正向间接血凝抗原、阴性和阳性血清,购自中国农科院兰州兽医研究所,试剂批号为:2001019。
    猪伪狂犬病、猪蓝耳病ELISA诊断试剂盒购自美国IDEXX公司,试剂批号为06685—330FT和09265—089HT。
    96孔血凝板,购自浙江华东医药公司。
    猪瘟血清抗体水平的检测采用正向血凝试验。具体操作步骤如下:即在96孔血凝板上,每孔加入50μl稀释液,每排第1孔加入待检血清50μl,递比稀释待检血清至血清浓度为l:512,最后50μl丢弃。再在每孔加入抗原诊断液25μl,置湿盒中于25℃孵育1.5-3h,判定结果。
    判定标准:凡能使50%的红细胞凝集的血清最大稀释倍数为该份血清的抗体效价,猪瘟血清抗体效价高于或等于1:16视为免疫合格。猪伪狂犬病、猪蓝耳病抗体检测参照美国IDEXX公司ELISA诊断试剂盒说明书进行。待检血清分别作l:20(猪伪狂犬病抗体检测)和1:40(猪蓝耳病抗体检测)稀释。取稀释好的待检血清100μl加入包被好的96孔聚苯乙烯诊断试剂盒中,置湿盒内25℃作用30min,取出,用洗涤液充分洗涤3次一5次,甩尽残留液体,每孔加入酶标抗体l00μl,置湿盒内2.5℃作用30min,洗涤。再在每孔中加入TMB底物溶液l00μl,置湿盒内25 ℃;作用15min后,加入终止液l00μl, 立即置B10—RAD550型酶标仪上650nm处测定。分别按所附计算公式判定是否为血清抗体阳性。
    二、结果
    猪瘟的免疫状况
    1 母猪、肥育猪、种猪猪瘟血清1抗体效价如表l所示。在所测试的608份母猪血清中,有3份(0.49%)血清样品检测不到猪瘟抗体,45份样品猪瘟血清抗体低于1:8,占检测总数的7.4%;有563份样品猪瘟血清抗体大于或等于l:16,占92.6%;在所测试的157份肥育猪血清中,大于或等于1:16的血清份数为98,免疫合格率为62.4%;78份种猪血清中,有61份血清抗体水平高于或等于l:16,占总数的0.2%。猪瘟免疫合格率排列顺序为母猪>种猪>肥育猪。
    猪血清中猪瘟抗体效价分布和免疫效果。在所有的843份猪血清中,有5份猪瘟血清抗体效价为0,占总数的0.6%,有722份猪瘟血清抗体水平高于、等于1:16,免疫合格率为85.64%。所调查的24个大型猪场,猪瘟免疫效果相差较大,免疫合格率为57.14%一l00%不等。但绝大多数场免疫水平较高,有l4个猪场猪瘟免疫合格率大于或等于90%。以猪场猪免疫合格率大于80%以上计为猪场免疫合格,则有20个猪场猪瘟免疫合格,占83.33%。可见,规模猪场猪瘟的免疫效果还是比较好的,具体结果见表l、2。

猪伪狂犬病抗体阳性检出率

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