3 实验室诊断 3.1 病料PCR检测 将采集的病料,经过研磨后,用RT-PCR的方法进行包涵体肝炎的特异性条带扩增,有一份病料扩增出了包涵体肝炎的特异性条带(见下图)。证实,发病鸡群有包涵体肝炎病毒感染。 3.2 病毒分离 取病变明显的肝组织研磨后,按照1:5倍(w/v)加入灭菌生理盐水制成悬液,反复冻融3次,8000转/min,离心5min,取上清液加入终浓度为4000 U/mL的青霉素、链霉素,37℃作用1.5 h除菌,经微孔滤器滤过(直径为200nm),经卵黄囊接种7d龄SPF鸡胚(0.2mL/只),接种后置37.8℃孵化箱孵化,观察鸡胚死亡情况。鸡胚于接种后96h内全部死亡,死亡胚体矮小,全身皮肤出血,肝脏呈灰黄色(见下图),与包涵体肝炎接种鸡胚致死病变基本吻合,进一步证实该鸡群感染包涵体肝炎。 鸡胚病变(左侧一只为对照鸡胚,右侧两只为病毒致死鸡胚) 3.3 动物回归试验 将收获的尿囊液经滴口的途径感染3d龄SPF鸡10只,在攻毒后2d~7d后出现死亡, 死亡率可高达 50%,死雏的肝脏呈土黄色,有小的坏死灶,有的伴有出血点,症状与发病鸡群相似。对照鸡无发病现象。这也证明鸡群感染包涵体肝炎。 4 治疗与预防 鸡包涵体肝炎属于腺病毒,其血清型较多,各血清型之间的较差保护有限,因此该病至今无有效疫苗。发病后可选用瑞普公司生产的黄芪多糖注射液和益肝护肾(瑞普生物生产),连续使用4天能明显改善症状。发病时,饲料户加倍添加多维素、维生素K3,添加抗生素,可以控制并发症和继发感染,改善鸡的营养状况,增强抵抗力,同时降低舍温。 做好传染性法氏囊病和传染性贫血的免疫接种工作,确保雏鸡有足够的传染性法氏囊病母源抗体,可免受传染性法氏囊病的早期感染,从而有助于预防雏鸡包涵体肝炎的发生。其次,加强饲养管理,做好消毒工作,可减少本病的发生。避免从有该病的孵化厂和鸡场引进种蛋和雏鸡。有病的鸡群应全部淘汰;消毒时,可用次氯酸钠或碘制剂等。饲料中适当添加抗生素及维生素有助于控制并发感染。
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