时间：2012-09-23 点击： 次 来源：阳光畜牧网 作者：阳光畜牧网 - 小 + 大
| 1、取病猪的扁桃体、淋巴结、脾或其他组织一小片，用滤纸吸干外面的液体，将其切面在稍为烘热的干净载玻片触压，作成压印片，置室温内干燥，或用所采的病理组织，做成切片。 2、滴加冷丙酮数滴，置一20℃固定15～20分钟，用磷酸盐缓冲液(PBS）轻轻漂洗3 ～ 4次，阴干后，滴加标记荧光抗体。置37 ℃湿盒内作用30分钟，取出用PBS充分漂洗。 3、用pH7.2的PBS漂洗3次，每次5 ～ 10分钟，干后，滴上甘油缓冲液数滴，加盖玻片封闭，用荧光显微镜检查。如细胞胞浆内有弥散性、絮状或点状的亮黄绿色荧光，为猪瘟；如仅见暗绿或灰蓝色，则不是猪瘟。 4、对照试验用已知猪瘟病毒材料压印片，先用抗猪瘟血清处理，然后用猪瘟荧光抗体处理。如上检查，应不出现猪瘟病毒感染的特异荧光。 5、标本染色和漂冼后，如浸泡于含有5%吐温—80的pH7.3，0.01mol PBS中lh以上，可除去非特异染色，晾干后，用0.1%伊文思蓝复染15 ～30s，检查判定同上。 |
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