抗体监测采用正相间接血凝试验,用兰州兽医研究所生产的O 型口蹄疫正向间接血凝试剂,首先对60 头试验仔猪分别于10、20、30 日龄进行母源抗体检测,在母源抗体降到5?2 以前进行首次免疫,免疫后每半月进行1次免疫抗体检测,在免疫抗体接近5?2 时进行二次免疫,二次免疫后,每月进行1 次免疫抗体检测,当免疫抗体再次接近5?2 时进行重复免疫,直至猪只出栏。以后根据抗体消长规律,对免疫程序进行调整和完善。结果分析及免疫程序的确定:通过检测数据可以看出仔猪在30 日龄时的母源抗体接近保护水平,故确定28-32 日龄进行首免(未断奶仔猪不宜接种口蹄疫灭活苗)。首免后由于1月龄的仔猪免疫应答弱,在首免1 个月时免疫抗体水平即接近5?2,遂将二次免疫定在首免后1 个月进行。二次免疫后,根据以往的经验,也为了减少采血对猪只的应激,改为每个月检测一次。数据显示,二免后第五个月免疫抗体水平仍在5?2 以上,可以保护到育肥猪出栏。最后,确定口蹄疫免疫程序为:28-32 日龄进行首免,1 个月后二次免疫;种猪可每4 个月免疫一次或在母猪每胎分娩前45~60天和断奶前7~10天各免疫一次(若在母猪分娩前45~60天免疫一次所产仔猪首免在60~65日龄,母猪在分娩前45天内不予注射口蹄疫疫苗),确保产后哺乳母猪的母源抗体效价达到1?1024以上。并且还根据经验和有关材料,为规模猪场制定出了其它疫病免疫程序,供猪场参考应用。 6.4合成肽疫苗的优点何在 合成肽疫苗注射后副反应轻微, 仅表现为减料和轻度发热的情况, 而呕吐、应激性倒地等情况均未出现; 同比下, 油乳灭活疫苗接种后存在一定程度的副反应, 特别在首免后48 h内减料、发热均较为严重, 个别猪有呕吐、应激性倒地等情况; 在二免后的48 h 内虽然也有一定程度的副反应, 但从群体的反应程度上已减弱; 在三免时, 各组接种疫苗的副反应基本可以忽略。 合成肽疫苗是以合成的一段免疫原性肽抗原配以适当的载体或/ 和佐剂制成的疫苗。相对于传统的弱毒苗和灭活苗以及其他几种新型的疫苗, 肽类疫苗具有以下特点: 合成肽疫苗是一种纯粹抗原性疫苗具有安全、无毒、稳定及副反应小等优点;由于其分子结构小而简单,很少会出现严重的并发症及医源性感染问题;第三是可精确定位, 合成T、B 细胞抗原表位并能可进行不同组合有望制成针对多种病原的超级疫苗。猪口蹄疫O型合成肽疫苗正是基于上述理念研制成功, 其主要含有口蹄疫O型病毒VP1 B 细胞表位( VP1 环) 和T 细胞表位的7 种寡肽,,将这些寡肽和钥孔?血蓝蛋白( KLH) 偶联, 然后混合于弗氏完全佐剂中, 制备成合成肽疫苗, 能够产生足够的抗体, 保护牛和猪不发病本试验中针对猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫后的副反应进行观察,发现除接种猪除短时间的发热及减料外, 并无常规口蹄疫疫苗接种后的高热不退、食欲废绝、呼吸困难、流涎、伴有呕吐、全身发绀、站立不稳等情况也证实了合成肽疫苗安全、稳定及副反应小等特点 。通过猪口蹄疫O型合成肽疫苗与油乳灭活疫苗的比较,不难看出猪口蹄疫O型合成肽疫苗不但可诱导较油乳灭活疫苗更高水平的特异性抗体, 并抗体维持时间较长;;且猪口蹄疫O型合成肽疫苗3次免疫组在抗体水平达到峰值后较二次免疫组在维持峰值过程中波动相对较小, 在生产实践中对于预防猪口蹄疫O型将具有更加积极的作用。在严格消毒和封场并保证未发病猪舍在两周内部感染的情况下,可对受严重威胁饲喂猪群紧急接种疫苗,接种刺激性小的、免疫力产生的快的合成肽疫苗,剂量应加1倍,接种猪群加强免疫1次(两次间隔15天,第二次为第一次基础上再增加1ml),但是对发病猪群不得采用紧急接种措施。 6.5母猪口蹄疫免疫其仔猪的母源抗体水平来决定适时首免 在母猪口蹄疫免疫合格的情况下, 通过母源抗体检测对仔猪的保护时间, 从而确定仔猪的首免时间。结果表明,:仔猪的母源抗体在28日龄时已低于临界值( 1:128);而首免1个月后,并不能达到有效的抗体保护力, 二免后21 天虽能上升一定的抗体水平,但仍不能达到有效保护力; 经过三次免疫后抗体逐渐上升,至免疫后的第40天时,抗体水平平均达到1:197.4, 已具有一定的保护力,所以建议口蹄疫疫苗应进行三次免疫。注射口蹄疫疫苗后15~20天后,每批猪都应采血做免疫监测,若免疫猪抗体效价1:256以下占70%时,要尽快强化接种,直到合格为止。
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