我国牛结核病的研究进展

时间：2011-10-25 点击：次来源：阳光畜牧网作者：阳光畜牧网 - 小 + 大

    4.2.4  酶联免疫吸附试验(ELISA)  因其特异性高，敏感性也好，受到国内外许多学者的认可。汪广荫、徐春厚等用ELISA方法对牛结核病血清抗体检测的最佳条件(包括抗原的种类、浓度、纯度、血清稀释度、是否包板等)进行研究探讨，认为ELISA方法是对目前常用的PPD方法的一个补充，因为ELISA方法可对大型养殖场进行结核病的初筛省去大量的时间和财力、物力的耗费；何昭阳发现传统PPD皮内变态反应存在非特异性的干扰，易出现假阳性，用ELISA方法可排除非典型分枝杆菌造成的非特异性干扰；刘辛等将ELISA方法同传统的PPD方法进行比较，发现二者有一定的差异，即PPD阳性牛、可疑牛用ELISA方法检测未必是阳性，且ELISA方法有较好的特异性；1972年Eagrall等发现了机体对结核分枝杆菌的免疫机理，认为机体先是有细胞免疫，其次是体液免疫，二者中分离的。细胞免疫随机体抵抗力增强而增强，体液免疫随机体抵抗力减弱而增强；PPD是检测细胞免疫，ELISA是检测体液免疫，所以PPD的检出率高于ELISA的检出率，但PPD不能包全所有ELISA阳性牛，且PPD阳性牛，临床也未必有表现，而ELISA阳性则意味着病情正在恶化，正是危险的传染源，所以ELISA方法从这一点上说比PPD要重要。另外，杨玉英等用SPA-ELISA及BA-Dot-ELISA对牛乳清抗体进行检测，因结核病可通过乳制品传染给人和其它动物，因此测定奶制品是否存在结核病感染，是一个值得研究的方法；王彩平等用BA-Dot-ELISA方法对牛血清抗体进行检测，方便、快速。目前有学者认为牛结核病检测应将PPD方法同ELISA方法结合起来有助于牛结核病检疫，排除非特异性干扰。
    4.2.5  分子生物学方法
    (1)聚合酶链式反应(PCR)：蔡宏等用PCR方法检测了54份血样标本的牛结核病，结果发现有1份阳性，但PPD皮内变态反应经二次检疫仍为可疑，作者认为此方法快速，敏感、特异，提高检出率，为牛结核病的检疫提供了新思路。吴青平等也用PCR方法对结核病进行了研究。
    (2)原位杂交技术：蔡宏等用原位杂交技术对用福尔马林固定的10份牛结核病的标本进行检测，结果发现有8份阳性，而常规抗酸染色仅有5份阳性，敏感性比常规抗酸染色方法高。该方法对固定标本、涂片标本的检测提供了新的方法，也为人们今后在样品保存方法的限制打开了通道，特别是对研究年代久远的样品检测提供了思路。
    (3)用限制性酶切片段长度多态性和PCR指印技术：蔡宏等用限制性酶切片段长度多态性和PCR指印技术对牛结核分枝杆菌的分型进行研究，给牛结核分枝杆菌的分型提供了新思路，也为今后结核分枝杆菌的分型提供了技术方法。而目前对牛结核分枝杆菌的分型操作时间长，蔡宏的方法则快速、方便、分型更细化。
    4.2.6  免疫金技术  简明华等用斑点金免疫渗滤试验检测99份PPD检测阳性牛，结果有60份牛结核分枝杆菌IgG抗体阳性，认为此方法可作为PPD反应的一个辅助试验。因目前我国结核病一直采用不免疫的方法，用此方法检测虽然检测率不是很高，但便于基层大面积推广，况且医学上已普遍采用此方法。
    5、防制措施
    5.1  疫苗  人结核病防制疫苗有卡介苗、营养缺陷结核减毒活疫苗、结核亚单位疫苗和结核DNA疫苗等，但目前对动物结核病的防制还没有商品化的疫苗使用，所以我国对牛结核病均采用不免疫，加强检疫、阳性牛一律扑杀的原则。
    5.2  药物  目前对结核病的治疗主要是用链霉素、卡那霉素、异烟肼等，但由于结核病是一种慢性传染病，不能间断药物，对奶牛等大型经济动物来说，不论从经济上还是时间上都不允许，而且为保证人的健康，世界各国加大对动物药物残留的监控，对动物结核病的治疗意义不大，所以各国在结核病的处理上均采用扑杀方式，家畜若检查出结核病，一律扑杀。但陈永生等在对结核阳性及可疑牛进行治疗时，发现治愈率为89.33%，并且结核病阳性牛中许多牛为胎重、高产奶牛，是否这类牛在怀孕期对结核菌素更敏感性些，作者认为对此类牛检疫时应避开怀孕期，推后检疫。
    5.3  检  疫
    5.3.1  检疫  在未进行检疫的牛群以及结核阳性反应的检出率在3%以上的牛群，用结核菌素皮内注射结合点眼的方法进行检疫，每年不少于4次。经过定期检疫，传染率在3%以下的假定健康群，用结核菌素皮内注射的方法进行检疫4次，对健康群每年检疫2次。对犊牛群，以皮内注射方法进行检疫，在20-30日龄进行第1次检疫，100-120日龄进行第2次检疫，6月龄进行第3次检疫。
    5.3.2  隔离  凡检出的结核阳性反应牛应立即调离牛群进行隔离，可疑牛进行复检，根据检疫结果，将牛群分为健康牛群、假定健康牛群及阳性隔离牛群。其检疫方法同3.1。
    阳性隔离牛群，最好屠宰，病牛肉及肉尸按国标GB16548-1996规程《家畜病害肉尸及其产品无害化处理规程》进行处理。如果数量过多，屠宰困难时，一律移入隔离牛群饲养，隔离牛群要远离假定健康群牛及健康牛群至少1km以外。隔离群的牛不再集中检疫，但要时常观察临床有无异常，必要时可进行细菌学检查，对确诊为阳性牛立即屠宰。
阳性隔离牛群产的牛奶必须严格消毒。
    5.3.3  消毒
    (1)定期消毒  每年春秋两次进行定期消毒。畜舍、饲槽、饲养用具；牛栏、牛床、天棚、舍内地面、粪尿沟及墙壁等用5%来苏儿或3%苛性钠液消毒，在消毒后2-6h用清水冲洗后使用。运动场清扫后用20%石灰乳或2%的苛性钠液消毒，亦可用更换30cm的表土的方法。
    (2)经常性消毒  畜舍出入口处应设置永久性消毒设备，风装5%的来苏儿或3%苛性钠液(每周更换一次)，进行出入消毒。
    (3)临时消毒  每当牛群检出阳性牛时，在隔离阳性牛时，进行一次临时大消毒，方法同定期消毒。
    (4)粪尿消毒  粪尿应集中堆放于距离畜舍较远的地方，外用泥土封闭经过发酵后利用。
    5.3.4  管理  牛场应加强管理，实行全进全出的制度，所有进出牛群一律检疫。发现阳性一律处理。

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