猪寄生虫病诊断方法

（一） 粪便虫卵检查法

1．直接涂片检查法 是简便和常用的方法，但检查时所用的粪便数量少，故检出率较低。本法是先在载玻片上滴一滴甘油与水的混合液，再用牙签或火柴棍挑起少量粪便加入其中，混匀，夹去较大的粪渣，最后使玻片上留有一层均匀的粪液，其浓度的要求是将此玻片放于书上，能通过粪便液膜模糊地看出其下的字为合适。在粪便上覆以盖玻片，置显微镜下检查。检查时应顺序地查遍盖玻片下所有部分。

2．水洗沉淀法 取粪便5克，加清水100毫升以上，搅匀成粪液，通过40~60目铜筛过滤，滤液收集于烧杯中，静置沉淀20分钟，倾去上清液，保留沉渣，再加清水混匀，再沉淀，如此反复操作直到上层液体透明后，吸取沉渣检查。

3．漂浮法 先往青霉素空瓶中加入适量饱和盐水，再往瓶内加入粪便1克，混匀，筛滤，滤液注入另一瓶中，补加饱和盐水溶液使瓶口充满，上覆以盖玻片，并使液面与盖玻片接触，其间不留气泡，直立20分钟后，取下盖玻片检查。此法适用于检查比重比饱盐水溶液轻的虫卵，如一般线虫卵和球虫卵囊等。

（二） 常见虫卵的一般特征

1．猪蛔虫卵 虫卵短椭圆，棕黄色，大小为56~87微米×46~57微米，壳厚，外表有凹凸不平的蛋白质膜，刚排出的虫卵含一未分裂的卵黄细胞，未受精卵呈现长椭圆形，壳较薄。

2．结节线虫卵 椭圆形，淡灰色，卵壳薄而光滑，内含8~16个球形的胚细胞。大小为45~55微米×26~36微米。

3．猪鞭虫卵 呈淡褐色，具有厚而光滑的外膜，两极呈栓塞状，形如腰臌，内有一胚细胞。虫卵大小为52~61微米×27~30微米。

4．兰氏类圆线虫卵 呈椭圆形，淡灰色，卵壳薄而光滑，卵内含有成形的幼虫，幼虫呈U字形。大小为45~55微米×26~30微米。

5．布氏姜片虫卵 呈淡黄色，卵壳薄，其一端有不明显的卵盖，卵黄均匀地散布于卵壳内。大小为130~140微米×80~85微米。

6．球虫卵囊 呈卵园或椭圆形，淡灰色，壳薄而光滑，内有颗粒状的原生质团块。其大小因种类不同而不同，大的为24.6~31.9微米×23.2~24.0微米，小的为11.2~16.0微米×9.6~12.8微米。

（三）猪疥螨的实验室检查方法

1．病料的采取

疥螨寄生于猪的皮内，因此应刮取皮屑，置于显微镜下，寻找虫体。刮取皮屑的方法很重要，应选择患病皮肤与健康皮肤交界处，这里的螨较多，往往在耳壳内容易寻找。先在要刮取的皮肤处滴加少许50%的甘油水溶液，然后用将边缘磨锐的不锈钢小勺耒刮取皮屑，直到皮肤轻微出血。将刮下的皮屑置入试管或塑料袋内，带回供检查。

2．检查方法

（1）显微镜下直接检查法 将刮下的皮屑置载玻片上，加入少量50%甘油水溶液，覆以另一张载玻片。搓压载玻片使病料散开，分开载玻片，置显微镜下检查。此法适合于检查皮屑中虫体较多的病料。

（2）虫体浓集法 为了在较多的病料中，检出其中较少的虫体，提高检出率，可采用浓集法。此法先取较多的病料，置于试管中，加入10%NaOH溶液，在洒精灯上煮沸数分钟，使皮屑溶解，虫体自皮屑中分离出来。然后其自然沉淀或以每分钟2 000转/分钟的速度离心20分钟，吸取沉渣镜检。

（四）猪附红细胞体的实验室检查方法

可用来作为诊断的最重要的临床症状是：贫血，对外界反应迟钝，发热高达40℃或更高。其它示病症状是：耳廓边缘变色，皮肤变态反应。

查找病原是确认该病的主要方法，新鲜血液加等量生理盐水稀释后置显微镜下观察，可见虫体呈球形，逗点形，杆状或颗粒状。由于虫体附着在红细胞表面有张力作用，红细胞在视野内上下震动或左右运动，红细胞形态也发生了变化，呈菠萝状、锯齿状、星状等不规则形状。血液姬姆萨染色后，虫体可染成紫红色，但该种染色方法的缺点是姬姆萨色素沉着，容易形成假像。血清经吖啶橙染色在荧光显微镜下可见各种形状的附红细胞体单体。但这一技术的复杂性使其只适宜实验室诊断。该染色情况下，附红细胞体呈浅至深桔黄色。

血清诊断方法包括IHA试验、补体结合试验或ELISA方法，但抗体的产生与病原数量的增多（而不是与感染发生的时间）有暂时的相关性。这意味着抗体的产生呈波浪形。即使数次急性发作后，抗体滴度也只能在2-3个月内维持较高水平，之后便会下降到阈值以下，这表明假阴性是常见的。所有血清学方法只适合于群体诊断。

PCR诊断已经成功地用于猪附红细胞体病。不过，该方法不能区别带虫猪和发病猪。

动物试验也是确认猪附红细胞体病的方法之一。常用的试验动物是小白鼠，用小猪作试验动物时则需摘除脾脏。怀疑为猪附红细胞体病的猪在切除脾脏后观察3-20天，若是带虫猪则会出现急性附红细胞体的症状，此时可通过查找血涂片中的虫体进行诊断。

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