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各种检测样品采集技术要点

时间:2010-08-16    点击: 次    来源:阳光畜牧网    作者:佚名 - 小 + 大

        一、血液
        1 病毒检验样品
        应在动物发病初体温升高期间采集。血液样品必须是脱纤血或是抗凝血。抗凝剂可选肝素或EDTA,枸橼酸钠对病毒有轻微毒性,一般不宜采用。采血前,在真空采血管或其他容器内按每10ml血液加入0.1%肝素 1ml或EDTA20ml,牛、马、羊从颈静脉或尾静脉真空采血,猪从前腔静脉真空采血或用注射器抽取,用量少时也可以从耳静脉抽取,家禽从翅膀静脉或颈静脉用注射器抽取血液。采集的血液立即与抗凝剂充分混合,防止凝固;采脱纤血液时,先在容器内加入适量小玻璃珠,加入血液后,反复振荡,以便脱去血液纤维。采集的血液经密封后贴上标签,以冷藏状态立即送实验室。必要时,可在血液中按每毫升加入青霉素和链霉素各500-1000IU,以抑制血源性或采血中污染的细菌。 
        2 细菌检验样品
        采血应在动物发病初体温升高或发病期,并未经药物治疗期间采集,血液应脱纤获加肝素抗凝剂(或EDTA或枸橼酸钠),但不可加入抗生素。血液密封后贴上标签,冷藏尽快送实验室,否则须置于4度冰箱内做暂时保存,但时间不宜过久,以免溶血。
        3 血清学检验样品 
        全血用真空采血管或注射器由动物颈静脉或其他静脉采集,用作血清学检验的血液不加抗凝剂或脱纤处理。为保证血清质量,一般情况下,空腹采血较好。采得的血液贴上标签,室温静置待凝固后送实验室,并尽快将自然析出的血清或经离心分离出的血清吸出,按需要分装若干小瓶密封,在贴上标签冷藏保存备检获冷藏送检。作血清学检验的血液,在采血、运送、分离血清过程中,应避免溶血,以免影响检验结果。中和试验用的血清,数天内检验的可在4度左右保存。较长时间才能送检的,应冻结保存,但不能反复冻融,否则抗体效价下降。供其他血清学检验的血清,一般不必加入防腐剂或抗生素,若确有需要时也可以加入抗生素(每毫升血清加青霉素、链霉素500--1000IU),亦可加入浓度为0.01%硫柳汞或0.08%叠氮钠。加入防腐剂时,不宜加入过量的液态量,以免血清被稀释。加入防腐剂的血清可置于4度下保存,但存放时间长亦宜冻结保存。
        采集双份血清检测比较抗体效价变化的,第一份血清采于病的初期并作冻结保存,第二份血清采于第一份血清后3--4周,双份血清同时送实验室。
        4 寄生虫检验样品 
        因不同的血液寄生虫在血液中出现的时机及部位各不相同,因此,需要根据各种血液寄生虫的特点,取相应时机及部位的血液制成血涂片,送实验室。
        5 常规检验样品
        血液需加抗凝剂,防治血液凝固,抗凝剂可用肝素或枸橼酸钠、EDTA钠均可,血液由静脉采集并与抗凝剂充分混合,尽快送实验室。运输中血液不可冻结,不可剧烈震动,以免溶血。 
        二、组织
        组织样品一般由扑杀动物或扑杀垂死的动物和病死尸体剖检中采集,也可以从活动物体内采集。从尸体采样时,先剥去动物胸腹部皮肤,以无菌器械将腹腔、胸腔打开,根据检验目的和生前疫病的初步诊断,无菌采集不同的组织。从活动物体采取组织样品,一般需使用特殊的器械。
        1 病毒检验样品
        做病毒检验的组织,必须以无菌技术采集,组织应分别放入无菌的容器内并立即密封,贴上标签,放入冷藏容器立即送实验室。如果途中时间较长,可作冻结状态运送,也可以将组织块浸泡在pH7.4左右的乳汉液或磷酸缓冲肉汤保护液内,并按每毫升保护液加入青霉素、链霉素1000IU,然后放入冷藏瓶内送实验室。 
        2 细菌检验样品
        供作细菌检验的样品,应新鲜并以无菌技术采集,如遇尸体已经腐败,某些疫病的致病菌仍可采集与长骨或肋骨,从骨髓中分离细菌。采集的所有组织应分别放入灭菌的容器内或灭菌的塑料袋内,贴上标签,立即冷藏送实验室。必要时也可以做暂时冻结送实验室,但冻结时间不宜过长。
        3 病理组织学检验样品 
        作病理组织学检验的组织样品必须保证新鲜,采样时,应选取病变最典型最明显的部位,并应连同部分健康组织一并采集。若同一组织有不同的病变,应同时各取一块。切取组织样品的刀具应十分锋利,将需要采取的组织切成厚约0.5cm、1—2cm大小的组织块,立即浸泡在95%酒精或10%中性甲醛缓冲固定液内固定(10%中性缓冲液:40%甲醛溶液100ml,无水磷酸氢二钠6.5g,磷酸二氢钾4.0g,蒸馏水加至1000ml)。固定液容积应是组织块体积的10倍以上,样品密封后加贴标签即可送往实验室。若实验室不能在短期内检验,或不能在两天内送出,经24小时固定后,最好更换一次固定液,以保持固定效果。

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