疫病监测

猪繁殖与呼吸综合征的血清学调查

日期：04-11 作者：阳光畜牧网- 小 + 大

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由PRRSV引起的一种接触性传染病。为了了解PRRS在我省几个较大种猪场中的流行情况，我们于2004年6月份利用ELISA诊断试剂盒进行了PRRS调查。报告如下。
1 材料与方法 
1．1 诊断试剂包被好的96孔酶标板5个，标准阴性、阳性血清各40 ml，样品稀释液150 ml，10倍浓缩洗涤液235 ml，HRPO标记抗猪抗体60 ml，TMB底物液60 ml，终止液60 ml，均购自全国畜牧兽医总站兽医诊断中心。
1．2 被检血清的采集和处理 812份血清均从猪前腔静脉采集，每份4～6 ml，自然凝固后分离血清。
1．3 洗涤液的配制取100 ml浓缩洗涤液加到900 ml蒸馏水中摇匀，1∶10倍稀释。
1．4 样品的配制取10 μl血清，加入390 μl样品稀释液，1∶10倍稀释。
1．5 操作步骤按PRRS ELISA诊断试剂盒(北京爱德士元亨公司产品)说明书进行。
1．6 检测结果的判定阳性血清对照平均值计算：
PC：PRRS=〖SX(C〗A1A(650)+B1A(650) 
PC：NHC=〖SX(C〗A2A(650)+B2A(650) 
阴性对照平均值的计算：（NC∶PRRS）
NC∶PRRS＝〖SX(C〗C1A(650)+D1A(650)〖〗2〖SX)〗
S/P比值计算：
S/P＝〖SX(C〗样本A(650)∶PRRS-样本A(650)∶NHC〖〗(PC∶PRRS)-(PC∶NHC)〖SX)〗
PRRS阳性对照平均值(PC∶PRRS)减去阴性对照平均值NC∶PRRS必须小于或等于0.12，NHC孔阴性对照平均值（NC∶NHC）必须小于或等于0.25，阴性对照S/P比值低于0.4，试验成立，否则重做。
2 结果 
2．1 测得标准阳性血清和阴性血清的OD650值后，通过计算，标准阳性血清PC∶PRRSPC∶NHC值大于0.15，NHC孔阴性对照平均值（NC∶NHC）小于0.25，试验成立。
2．2 812份被检血清的检验结果见表1。
表1 ELISA检测部分猪血清PRRS抗体结果
3 讨论 
3．1 PRRS ELISA在大规模血检时，具有敏感性强、特异性强、重复性好等特点。本次试验在对照成立的情况下，阳性率达11.33%，说明该病在我省主要种猪场存在，与这几年从PRRS阳性场引进大量种猪和未进行疾病的免疫预防有关。
3．2 本次调查的均是我省的主要种猪场所在的几个县担负给我省各猪场提供良种种猪的任务，这些猪场都未进行该病的免疫预防。如此该病可能会很快在我省各养猪场流行，希望有关部门引起高度重视。

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