监测流调

荧光PCR的12种异常扩增曲线分析​

日期:04-04 作者:佚名- 小 + 大

4、扩增曲线分布混乱

图5 异常扩增曲线(4)

原因分析:

荧光波长范围存在重叠,影响PCR检测通路采集荧光信号。

解决方案:

进行荧光补偿,再分析可正常。

5、扩增曲线扩增不完整

图6 异常扩增曲线(5)

原因分析:

(1)模板污染导致降解,或者样本浓度低、加样量不准确导致扩增效率低。

(2)模板浓度太高,或者存在抑制成分。

(3)荧光染料浓度低,或者仪器问题荧光收集异常。

(4)Taq酶无活性或活性降低。

(5)试剂配制没充分混匀,分装不均匀。

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