养殖场非洲猪瘟病毒变异株防控技术指南

病死猪：在确保养殖场内生物安全的情况下，及时采集病死猪淋巴结、肺脏等样品在当天送检。有研究报道非洲猪瘟病毒变异株在猪淋巴结、肺脏病毒载量最高，采集相应组织样品进行检测，可提高检出率。

环境：定期对猪场内料槽、风机等进行环境样品检测。国家非洲猪瘟区域实验室(广州)研究发现，养殖场内料槽样品的病毒核酸检出时间早于猪只出现异常临床症状的时间。

（三）科学采样检测

国家非洲猪瘟区域实验室(广州)研究发现，采取口鼻拭子联合尾根血混样，或口鼻拭子联合腹股沟淋巴结穿刺混样的检测采样方法，可提高病原检出率。同时还应当采集临床异常猪的前腔静脉血或尾静脉血，分离血清后进行非洲猪瘟病毒抗体检测。

采样：使用聚丙烯材质拭子，避免使用头部为棉花制品的拭子、含海藻酸钙拭子以及木柄拭子，防止棉花纤维对蛋白质吸附影响病毒洗脱效果及抑制PCR反应的物质影响检测结果。

样品保存：样品保存管应使用无菌、对核酸无吸附作用的螺旋盖塑料管。每个样品管应再套一个样品袋防止样品泄露和污染。

新鲜采集的临床标本应在2--8℃条件下，在采集后2---4h内送至实验室。用于病毒分离和核酸检测的样品应当尽快进行检测，能在24h内检测的样品可置于4℃保存;24 h内无法检测的样品则应当置于一70℃或以下保存(如无一70℃保存条件，则于—20℃冰箱暂存)。

病原检测方法：可采用非洲猪瘟病毒(P72/CD2v/MGF)三重实时荧光定量PCR方法，也可采用发明专利CN 112646934 B提供的非洲猪瘟病毒(P72/EGFP/mCherry)三重实时荧光定量PCR方法检测病毒核酸。对非常见基因变异且临床症状特殊的病例，需进一步送相关实验室进行全基因组测序鉴别。

抗体检测方法:采用《非洲猪瘟诊断技术》( GB/T 18648 )规定的间接ELISA、阻断ELISA等方法进行抗体检测。

（四）强化生物安全防护措施

我国非洲猪瘟防控实践表明，落实好常态化防控措施能有效阻止非洲猪瘟病毒感染。针对非洲猪瘟病毒变异株的流行特点，要持续从人、车、物、猪等方面强化防控措施。

1. 人员管理

人员在进场前3天不得去菜市场、猪场、屠宰厂(场)、无害化处理厂(场)及动物产品交易市场等生物安全高风险场所。根据不同区域生物安全等级进行人员管理，人员遵循单向流动原则，禁止逆向进入生物安全更高级别区域。

进入办公/生活区域人员：要更换干净消毒过的衣服及鞋靴，洗手消毒并有效淋浴后，方可进场，淋浴时必须注意指甲的清洗。

实践表明，一次有效的淋浴(沐浴露和洗发水淋浴5分钟以上)可以消除人员体表携带的病毒;随身物品经消毒后入场，严禁携带猪肉制品入场;未经允许，禁止进入生产区。进入生产区前，人员要在生产区淋浴间洗澡，所携带物品须经生产区物资消毒间消毒后，方可带入。

进入猪舍的流程：人员按照规定路线进入各自工作区域，禁止进入未被授权的工作区域。每栋猪舍入口处都应该放置消毒盆(桶)、洗手消毒盆。进出猪舍前注意洗手，清洗、消毒工作靴，程序为先刷洗鞋底、鞋面污物，后在脚踏消毒盆(桶)浸泡消毒。人员离开生产区，将工作服放置含有消毒剂的桶中浸泡消毒。严禁饲养人员互串猪舍。

2. 车辆管理

猪场车辆管理：主要包括外来运猪车、饲料运送车、收集死猪/猪粪车、私家车等外部车辆;内部运猪车、拉料车、运死猪/猪粪车等内部车辆。外部车辆进入场区需经彻底清洗、消毒、烘干。

外来运猪车管理：外来运猪车应为在畜牧兽医部门登记的备案车辆，经过清洗、消毒及干燥后，方可接近猪场出猪台或中转站(台)。运输后对车辆所经道路进行彻底消毒。

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