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图2. MGF_110-1L 基因遗传变异分析 2020 年田间分离的 22 株病毒与 HLJ/18 的 MGF_110-1L 基因系统进化树(A)。利用 Neighbor-joining 方法对 MGF_110-1L 序列进行分 析绘制系统进化树(Bootstrap value=1000)。与 HLJ/18 相比,分离株 MGF_110-1L 基因的核 苷酸差异(B)和氨基酸差异(C)。 3、ASFV 分离株的体外培养特性鉴定 根据分离地点及基因组遗传变异特点,我们选取四株 ASFV(HuB/628/20、 HLJ/44/20、HLJ/HRB1/20 和 HeB/Q3/20)进行体外生物学特性分析。间接免疫 荧光(IFA)结果显示 4 株病毒均可以在 PAM 细胞上进行有效复制(图 3A)。HAD 试验确定 HuB/628/20 和 HLJ/44/20 可以形成典型的 HAD 表型;但 HeB/Q3/20 和 HLJ/HRB1/20 呈现 HAD 表型阴性,不能吸附红细胞(图 3A),与 基因组变异分析结果一致。电镜观察四株病毒之间没有明显的形态学差异(图 3A)。复制动力学显示,四株病毒可以在 PAM 中有效复制,感染后第五天细胞 上清液中的 p72 基因拷贝数均大于108/mL(图3B)。 图 3. ASFV 分离株体外生物学特征
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