实验室检测结果与临床诊断不符的原因分析

正确的诊断是制定合理、有效防治措施的根据，所以诊断是防治工作的前提，诊断是临床工作的基础。实验室检测作为临床诊断的辅助，可有效提高临床诊断的准确性，有助于早期诊断和群体的监测。但有时也会出现实验室检测结果与临床诊断不甚相符的情况，究其原因，可归纳为三个方面，即样品的因素、检测试剂的因素、人为因素。

一、样品的因素

首先，采样要科学，具有代表性，通过检测能够很好地反映所代表的群体的状况。

A、采样方式：分点采样，同一圈舍，随机抽取，避免采集同一窝或者相邻较近的，避免全部采集发病猪群、弱仔等。

B、采样数量：做抗体检测时，种猪群采样数一般抽检比例为10%，保育育肥阶段采样数抽检比例在3-6%，可根据不同情况酌情增减，但同一阶段采样数应不少于5头。

C、采样规则：如果是做病原检测，应根据病原的组织嗜性不同，选择不同的组织。检测猪瘟，建议采集扁桃体、淋巴结；检测伪狂犬建议采集扁桃体、脑组织或者血液；蓝耳建议采集肺脏等。

如果是做抗体检测，应根据检测目的，选择不同的采样方式。

（1）制定合理的免疫程序，可按照下表采集不同阶段猪群血清。

（2）评价免疫效果，可采用“5个5”原则。

（3）疫病发生时的鉴别诊断

•  猪群发病时同时抽检健康猪和发病猪各≥5头（同一阶段）

•  猪群发病比较严重时，发病率7天内＞10%，还应抽检发病阶段前 一个月的猪群

•  产房仔猪出现问题一定要抽检产房母猪，仔猪出问题的母猪和不出 问题的母猪各≥5头

其次，样品的保存和运输要得当。

血清应避免溶血，刚采的血不要立刻放在冰袋上或放冰箱，易发生溶血。可先常温或37℃存放1-2小时后，待血清自然析出后，将血清转移至离心管中，再放冰箱。短时间保存（一周左右）4℃冷藏即可，如果长时间保存（超过两周）应-20℃保存。

如果是病变组织，做细菌检测，病料冷藏即可。做病毒检测，病料要及时冻存。

运输过程中可选择冰袋或者干冰使样品保持在所需的温度。

最后，样品信息要明确。详细的信息记录能够在获取检测结果后有效对应猪群进行数据分析。

（1）猪群信息：日龄，胎龄，健康状况。

（2）免疫信息：免疫时间、免疫剂量、疫苗厂家批号等。

（3）做好记录：猪只信息，采血时间，采血数量，血清编号等。

二、检测试剂的因素

首先，做抗体检测时，检测试剂应能准确体现抗体产生的一般规律。如果要评价疫苗免疫效果或动物机体抗体水平，建议选用线性范围宽的定量检测试剂，如要做疫病净化，建议选用灵敏度高特异性好的检测试剂。如在做伪狂犬净化时，国家推荐使用爱德士的检测试剂盒，其采用的阻断ELISA方法，特异性好，同时通过加大加样量的方式提高了检测灵敏度，种猪只要检测到伪狂犬野毒抗体阳性就要隔离淘汰。但在评价抗体水平时，这种试剂盒的弊端就会显现，要保证特异性好灵敏度高就不能兼顾线性范围，在血清中抗体水平较高时，比如在检测母猪猪瘟抗体时，使用爱德士的试剂盒易出现假低值甚至假阴性，这种现象也称为虎克效应，可通过将母猪血清倍比稀释后再次检测以验证检测结果。因此根据需求不同应选用适合的检测试剂盒。其次，试剂的稳定性也是影响检测结果的重要方面，如果检测试剂稳定性较差，对温度变化比较敏感，或者不同批次间的试剂检测数据差异较大，也会对检测结果的分析产生影响。最后，检测试剂的保存应得当，不要使用过期或变质的试剂。

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