血凝和血凝抑制试验中配制红细胞悬液的体会

　　高致病性禽流感新城疫免疫抗体检测试验中，由于实验结果的判定直接依赖红细胞的凝胶状况，因此，配备红细胞悬液是这项试验的重要环节，在几年的操作过程中我们总结了以下几点体会。
　　1、鸡的选择
　　试验要求为SPF鸡，如果没有SPF鸡，可用常规试验证明体内无禽流感和新城疫抗体的成年健康公鸡。
　　2 、采血前的准备
　　采血前鸡必须足够饮水，否则血液特别黏稠而导致采血过程中易发生凝结现象。在采血过程中，用小号针头的注射器吸取阿氏液1ml,取至少3只SPF鸡，采血约2-41ml，与阿氏液混合，放入装10 ml阿氏液的离心管中混匀，采血速度必须快，以防发生凝结。
　　3、 采血
　　环境对血液有很大程度的影响，采血一般选在比较凉爽的环境下进行。环境温度太高，或阳光直射则在采集过程中血液易发生凝固。鸡采血一般选在翅根部的静脉，此处的血管比较粗明显，易于刺入，采血流畅，成功率高。采集完毕后将血液和阿氏液轻轻混匀慢慢推入PBS液中以备用。
　   4、1﹪鸡红细胞悬液的配备
　　采集至少3只鸡的血液置于离心管内混合，用PH7.2的PBS 液连续洗涤3次。用吸管移去上清液及沉淀红细胞上层的白细胞薄膜，待最后一次完成后弃去上清液，用移液器吸取1ml红细胞加入到99ml的PBS液中，便可制得1﹪鸡红细胞悬液，4℃保存不宜超过3天使用。
　　5、体会
　　在配制红细胞悬液的过程中，尽可能避免血液凝结和红细胞破裂现象发生。常规下，悬液在静止后沉于瓶底，上清液透明，若轻轻摇动则红细胞似沙粒。如有团状和血丝状现象存在，则悬浮液不能使用。