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邢清洁 河北省内丘县农业局 （河北 内丘 054200） 在重大动物疫病防控中，免疫效果起着举足轻重的作用，而在免疫效果监测中，样品的采集方法、数量和质量直接决定着监测结果的准确性和监测结论的科学性。因此，在实际操作中，应该掌握科学的采样方法，避免可能影响血样质量的操作。
1 采样前的准备
1.1采样器具准备 采样箱、保温箱或保温瓶、封口膜、封条、冰袋、酒精棉、5ml一次性注射器、塑料离心管（2ml）、易封口样品袋、塑料包装袋等。
1.2采样记录用品 不干胶标签、签字笔、记号笔、采样单等。
1.3人员防护用品 口罩、一次性手套、乳胶手套等。
2 选择合适的时间 为保证监测的科学性，应在家禽免疫后14天开始采集样品；采样前，家禽最好禁食8小时。
3 采样数量和剂量 为使样品具有一定的代表性，应在同群中随机采样，每群采集血样20-30份，每份全血在3ml左右。
4 常用采血方法
4.1雏禽采血 雏禽多采用心脏采血。左手抓鸡，右手持采血针，平行颈椎从胸腔前口插入，回抽，有血液回流时，将针芯向外拉使血液流入针管。
4.2青年禽和成年禽的采血
4.2.1翅静脉采血 侧卧保定禽只，在翅下静脉处，用酒精棉球消毒，使一次性注射器从无血管处向翅静脉丛刺入，有血液回流，将针芯缓慢外拉使血液流入针管。
4.2.2翼根采血 侧卧保定禽只，展开翅膀，露出腋窝处，拔掉羽毛，用酒精棉球消毒。拇指按压近心端，待血管怒张后，用5ml一次性注射器，由翼根向翅方向平行刺入静脉，放松对近心端的按压，外拉真芯缓慢抽取血液。
用注射器抽取血液时，要防止静脉塌陷和出现气泡。采血完毕，用干棉球按压止血，以防血液外流。
4.2.3心脏采血
4.2.3.1侧卧保定采血 助手抓住禽两翅和两腿，右侧卧保定，在触及心搏动明显处，或胸骨脊前端至背部下凹处连线的1/2处消毒，垂直或稍向前方刺入2-3厘米，回抽见有回血时，把针芯外拉使血液流入采血针管。
4.2.3.2仰卧保定采血 胸骨朝上，用手指压离嗉囊，露出胸前口，用装有长针头的注射器，将针头沿其锁骨俯角刺入，顺着体中线方向水平穿行，直到刺入心脏。
5 血清分离
5.1在室温下阴凉处倾斜放置2-4小时，待血液凝固后自然析出血清。
5.2用无菌玻璃针剥离血凝块，将试管放在装有25-37°C温箱内1小时或置于4°C冰箱内过夜。
5.3用离心机以1500-2000转/分离心5分钟，分离血清。
如果在一次性注射器中自然析出血清，注射器中应吸入1-2毫升空气。待大部分血清析出后，将血清移到小塑料离心管中，盖紧盖子，封口，贴标签。
6 样品的记录
采样时，要认真填写采样单，包括场名、畜主、日龄、联系人、电话、存栏数量、采样数量、样品名称、编号、免疫情况等。
采样单用钢笔或签字笔逐项填写，样品标签和封条用签字笔填写，保温容器外封条用钢笔或签字笔填写，小塑料离心管用记号笔标记。样品与采样单一一对应，采样单装在塑料包装袋内，并随样品送实验室。
7 样品的包装
每个血清样品要单独包装，分装在不同的小塑料离心管中或小瓶中，一一编号，同群样品再用样品袋包装，样品袋外粘贴标签，标签注明样品名、样品编号、采样日期等。
8 血清保存与运输
8.1保存 血清应冷藏或冷冻保存。采集样品后，如果能在短时间内送达实验室，则可以放在4°C左右的容器中运送；需长期保存的，将血清置于-20°C冷冻。2-8°C条件下，血清可保存15d；-15°C以下可保存2年。
8.2运输 为避免样品泄漏，应将样品容器密闭后装在保温瓶或箱中运输。如需寄送，将装样品的容器放到更大的具有坚实外壳的容器内，并垫上足够的缓冲材料。
所有样品都要贴上详细标签，内附填写完整的采样单。
8.3解冻 血清不宜反复冻融。反复冻融会使血清中的脂蛋白和纤维蛋白变性，导致出现絮状沉淀物。血清从低温冰箱取出后，最好经4°C冰箱、室温、37°C水浴条件逐步均匀溶解，待血清完全溶解后再用。
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