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猪呼吸道疾病综合征(PRDC)是由一种或多种细菌、病毒、加上环境应激所引起的混合感染，通常由细菌、病毒或支原体首先侵入猪的呼吸道，破坏猪的呼吸道防疫屏障后，其它气源性病菌乘隙进入猪的呼吸系统，造成继发感染，故可将病原分为原发性病原和继发性病原。原发性病原有猪肺炎支原体(M.H)、支气管败血波氏杆菌(B.B)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪流感病毒猪(SIV)、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪瘟病毒（CSFV）、猪呼吸道冠状病毒(PRCV)等；继发性病原有猪链球菌(S.S)、多发性巴氏杆菌( Pm)、猪副猪嗜血杆菌(HPS)、猪附红细胞体(EH)等。本研究通过对PRDC发病猪群进行病原分离和鉴定，旨在掌握2004-2007年河北省规模猪场PRDC的主要病原，并预测未来发展趋势，为有目的、有重点地开展PRDC的综合防控提供参考，从而减少其对猪群的危害。 （二）材料 1.试验猪场及猪群。样本采自全市17个县（市、区）68个规模猪场（其中大型规模猪场14个，中型规模猪场16个，小型规模猪场38个）的猪呼吸道疾病综合征发病猪群。其中采集病料最多是仔猪群（哺乳仔猪和保育猪），共46个；其次为育肥猪群， 共22个，种猪群（生产母猪和种公猪）最少，共11个。 2.病原学样本。采集病死猪的血液，脑组织，淋巴结，胸、腹腔积液，肺脏、肝脏、肾脏、脾脏、心脏等内脏器官，用于病毒、细菌和寄生虫的检测。 3.试剂及菌株。CSFV RT-PCR检测试剂盒、PRRS RT-PCR检测试剂盒、PRV PCR检测试剂盒、PCV-2 PCR检测试剂盒，均由北京爱德士元亨生物科技有限公司生产。麦康凯琼脂板、巧克力琼脂板、鲜血（5%绵羊血）琼脂板、三糖铁琼脂斜面按常规方法配制。肝素购自保定化学试剂公司；微量生化发酵管购自杭州天和微生物试剂有限公司；NAD购自北京鼎国生物科技发展中心；金黄色葡萄球菌株由河北农业大学动科院微生物实验室保存。 4.主要仪器。电子天平、真空干燥器、电泳槽、微波炉、组织研磨器、-20℃冰箱、Eppendorf可调移液器、Heraeus台式高速冷冻离心机、Biometra PCR基因扩增仪、UVP紫外凝胶成像处理系统、Tanon EPS100型电泳仪（北京六一仪器厂）、Forma Scientific CO2培养箱。 （二）方法 病毒性病原体采用PCR或RT-PCR方法，细菌性病原采用培养、分离鉴定方法，寄生虫通过染色镜检方法进行检测。 阳性率统计以猪场为单位，只要从该猪场采集的组织、血样等样本中检测到病原，则判断该猪场感染该病原。场阳性率为20%以上的病原体为该规模场PRDC的主要病原。 二、结果 结果见表1、表2和表3。 表1 2004-2007年唐山地区PRDC病原学调查场阳性率 % | 年度 | PRRSV | PCV-2 | PRV | CSFV | E.coli | Sal. | Pm | S.S | HPS | APP | EH | Tpl | | 2004 | 15.38 | 61.54 | 23.08 | 53.85 | 7.69 | 7.69 | 7.69 | 0 | 0 | 30.77 | - | 30.77 | | 2005 | 44.44 | 44.44 | 27.78 | 38.89 | 33.33 | 0 | 0 | 0 | 0 | 66.67 | - | 0 | | 2006 | 91.30 | 65.22 | 30.43 | 0 | 52.17 | 26.09 | 8.70 | 8.70 | 0 | 34.78 | 39.13 | 0 | | 2007 | 100.00 | 72.73 | 0 | 0 | 36.36 | 45.45 | 9.09 | 18.18 | 9.09 | 36.36 | 72.73 | 9.09 | | 合计 | 69.74 | 61.84 | 19.74 | 18.42 | 35.53 | 22.37 | 6.58 | 7.89 | 2.63 | 42.11 | 32.89 | 7.89 | 注：“-”指未进行检测。 表2 2004-2007年不同类型规模猪场PRDC病原学调查场阳性率 % | 猪场 规模 | 年度 | PRRSV | PCV-2 | PRV | SCFV | E.coli | Sal. | Pm | S.S | HPS | APP | EH | Tpl | | 大型 | 2004 | 0 | 50.00 | 0 | 0 | 0 | 0 | 50.00 | 0 | 0 | 0 | - | 0 | | 2005 | 66.67 | 33.33 | 33.33 | 66.67 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 66.67 | - | 0 | | 2006 | 100.00 | 60.00 | 40.00 | 0 | 60.00 | 0 | 0 | 0 | 0 | 40.00 | 60.00 | 0 | | 2007 | 100.00 | 100.00 | 0 | 0 | 50.00 | 0 | 0 | 0 | 0 | 25.00 | 100.00 | 0 | | 合计 | 78.57 | 64.29 | 21.43 | 14.29 | 35.71 | 0 | 7.14 | 0 | 0 | 35.71 | 50.00 | 0 | | 中型 | 2004 | 33.33 | 33.33 | 33.33 | 33.33 | 0 | 33.33 | 0 | 0 | 0 | 33.33 | - | 0 | | 2005 | 100.00 | 33.33 | 33.33 | 33.33 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 66.67 | - | 0 | | 2006 | 100.00 | 100.00 | 33.33 | 0 | 50.00 | 0 | 0 | 0 | 0 | 33.33 | 0 | 0 | | 2007 | 100.00 | 50.00 | 0 | 0 | 0.00 | 50.00 | 0 | 0 | 0 | 25.00 | 50.00 | 0 | | 合计 | 90.00 | 60.00 | 20.00 | 10.00 | 15.00 | 25.00 | 0 | 0 | 0 | 35.00 | 20.00 | 0 | | 小型 | 2004 | 12.50 | 75.00 | 25.00 | 75.00 | 12.50 | 0 | 0 | 0 | 0 | 37.50 | - | 50.00 | | 2005 | 25.00 | 50.00 | 25.00 | 33.33 | 50.00 | 0 | 0 | 0 | 0 | 66.67 | - | 0 | | 2006 | 83.33 | 50.00 | 25.00 | 0 | 50.00 | 50.00 | 16.67 | 16.67 | 0 | 33.33 | 50.00 | 0 | | 2007 | 100.00 | 80.00 | 0 | 0 | 60.00 | 60.00 | 20.00 | 40.00 | 20.00 | 50.00 | 80.00 | 20.00 | | 合计 | 57.14 | 61.90 | 19.05 | 23.81 | 45.24 | 28.57 | 9.52 | 14.29 | 4.76 | 47.62 | 33.33 | 14.29 | |
