疫病监测

血清学解读猪繁殖与呼吸综合征病毒

日期:09-26 作者:佚名- 小 + 大

        1、猪繁殖与呼吸综合征病毒
  猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)现在流行于美国、加拿大、欧洲和亚洲。但科学家怀疑该病毒在世界各地均有分布。世界其它地区的诊断学家不断发展该病的诊断技术,检测病毒将变得更为容易,也将印证我们的怀疑。养猪从业者可以从确诊PRRS的过程中了解该病。该病的临床症状复杂,可感染呼吸系统和生殖系统,并且易感猪的猪龄范围广泛,因此在遇到临床症状多样的疾病时,PRRS是值得怀疑的对象。
  20世纪80年代中晚期,易感猪感染PRRS能够引发较为一致的临床症状。许多感染PRRS的猪群同时发生繁殖障碍和呼吸道疾病,且繁殖障碍更为严重。母猪表现以下典型症状:中度发热(104到106华氏度),短时间的食欲减退,早产(108-110天)导致死胎数明显增加,随后出现妊娠早期母猪流产,木乃伊胎增多。出生的活仔中很多较弱,几小时内死亡;存活下来的仔猪生长缓慢,易发细菌病,最终死亡,通常很难控制。这些细菌病中包括链球菌病、鼻炎和格氏病(副猪嗜血杆菌)等等。通常,断奶前和断奶后猪出现严重的呼吸道疾病,表现为急促的腹式呼吸,多称为“呼吸困难”。PRRSV在肺内增殖引起间质性肺炎,但其他病毒也可引起类似病变,因此发现间质性肺炎提示可能存在PRRSV感染,但不等同于确诊为PRRS。
  PRRS在猪群中渐渐“成熟”,其临床症状也随之发生改变。前面描述同时存在繁殖障碍和呼吸道症状的经典PRRS仍有发生。但更为常见的是只出现繁殖障碍或呼吸道症状。并且现在发生时呼吸道症状比繁殖障碍明显。
  保育猪和生长育肥猪出现呼吸道问题,尤其是抗生素治疗效果不明显时,PRRS可疑。即使已知这种呼吸道疾病的病原为胸膜肺炎放线杆菌或猪霍乱沙门氏菌,但PRRS感染也可能在其中发挥启动或加重病情的作用。
  2 血清学诊断
  现有的检测PRRSV特异性抗体的方法包括间接荧光抗体检测(IFA)、血清病毒中和试验(SVN)、免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)。其中,IFA,SVN和ELISA检测是现阶段北美兽医诊断实验室采用的检测方法。
  IFA具有高度的特异性(99.5%),但不同动物个体的敏感性不确定。与ELISA相比,IFA的优势在于能够确定抗体滴度。根据试验中血清的初始稀释度,滴度为16或20视为阳性。然而由于结果为主观判定,不同实验室或检测员进行检测时IFA滴度终点会有差异。这也限制了IFA在小规模样品检测上的应用。此外,由于PRRSV抗原的多样性,检测所用的PRRSV毒株不同,检测结果也会不同(阴性vs阳性,或滴度)。
  最近出现了检测PRRSV特异性IgM抗体的IFA方法。这种方法可用于检测急性/最近发生的PRRSV感染,滴度16或20为阳性。很有意思的是,研究表明IgM阳性样品中81%的样品可分离到病毒。然而,值得关注的是该方法存在由非特异性IgM引起的假阳性结果,因此该方法在广泛用于常规诊断之前必须对其所有的实验性能包括特异性和敏感性进行评估。
  ELISA的不同形式包括:采用样品与阳性比值的间接ELISA,直接采用OD值的间接ELISA和阻断ELISA。IDEXX ELISA试剂盒检测样品,S/P值等于或高于0.4时为阳性。据报道,该方法灵敏而特异,敏感性为100%,特异性为99.5%。
  尽管S/P值与IFA滴度间可能存在关联,但生产商不推荐以这种方式来解读S/P值。许多兽医诊断学家和从业者认为S/P值为2.5或以上即表示最近发生或正在发生感染。自动化操作是该方法的一大优势,因为自动操作差异小,且易于实现高水平的质量控制。此外,ELISA还有其他优点:a)欧洲株和美洲株PRRSV抗体均可检测;b) 检测周期短;c) 通过USDA和AgCanada认证。
  SVN检测也是一种特异性检测,但以前的试验显示SVN的敏感性低于IFA和ELISA方法。目前,滴度4视为阳性。最近的研究显示被测血清中加入新鲜猪血清可提高SVN检测的敏感性。即便如此,SVN方法也最好作为一种研究工具而非常规诊断手段来使用。
  3 血清学结果
  试验感染PRRSV的猪,IFA,ELISA,SVN首次检测到病毒特异性抗体IgG的时间分别为感染后7-11,9-13和9-28天,达到高峰的时间则为感染后30-50,30-50和60-90天。感染后5天内检测到PRRSV特异性IgM抗体,并可维持到感染后21-28天。实验和田间观察显示IFA, ELISA和SVN检测抗体滴度通常分别在4-5个月,4-10个月和12个月时降至不可检测水平。未接触过该病原的猪接种疫苗后抗体也呈现相同的时间模式。

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