禽传染性支气管炎的诊断与防控

过去，病毒中和试验（ VN） 和血凝抑制试验（ HI） 等血清学检测试验被广泛用于检测和禽传染性支气管炎病毒毒株血清分型。血清学检测方法也被用于检测疫苗接种后的鸡群保护。血清型特异性抗体通常使用血凝抑制试验，即使血凝抑制试验有时的检测结果不太准确。另一方面，ELISA 检测是一种更灵敏，更容易应用于现场使用和监测疫苗接种或暴露后的抗体反应的检测方法。然而，不与常用抗血清发生交叉反应的不同禽传染性支气管炎病毒毒株血清型的出现通常使得血清学检测在对新的或新兴的禽传染性支气管炎病毒分离株进行分类时不太适用并且是非决定性。
  3.2 禽传染性支气管炎病毒的分离鉴定 

病毒分离一直是诊断禽传染性支气管炎病毒的金标准。在疾病早期采集样本并确保正确的采样技术是成功分离禽传染性支气管炎病毒的关键。为从拭子中成功分离病毒，建议将拭子样本置于培养基或PBS 的缓冲溶液中，然后再将其运送到实验室。严格的技术要求和因素，例如病毒在鸡蛋或细胞培养物中多次传代所需的时间，限制了病毒分离作为禽传染性支气管炎病毒感染诊断方法的选择。尽管如此，不同的实验室使用不同的分离方法，如鸡胚接毒、细胞接毒和器官接毒。
  3.3 免疫组织化学法 

免疫过氧化物酶和免疫荧光是两种重要的组织化学方法，用于检测和确认来自受感染组织和/ 或细胞的禽传染性支气管炎病毒抗原。这些方法基于抗原- 抗体反应。免疫组织化学法已成功用于定位组织样本中的禽传染性支气管炎病毒抗原。间接免疫荧光检测是最常用的荧光技术。
  3.4 分子生物诊断方法 

鉴于其灵敏度提高和报告时间缩短，分子诊断分析，如RT-PCR、实时PCR、限制性片段长度多态性（RFLP）和基因组测序，几乎取代了传统的血清学和禽传染性支气管炎病毒诊断的病毒培养方法。
  3.5 电子显微镜观察法 

电子显微镜根据冠状病毒的形态特征提供了一种直接检测和鉴定生物样本中鸡传染性支气管炎病毒的方法。透射电子显微镜（TEM）也是一种有用的工具，它可以使受感染细胞中的病毒样颗粒可视化。然而，这种方法通常用于了解病毒附着和进入细胞，但不是特定的诊断检测。
  4、防控建议
  由于目前禽传染性支气管炎在我国大部分地区的鸡群中均有流行的情况，一定要根据当地禽传染性支气管炎的流行情况进行针对性的防控，其中疫苗接种是禽传染性支气管炎防控方面最有效也是最重要的手段，因此应根据禽传染性支气管炎在当地的流行情况制定合理的疫苗接种计划，防止鸡群暴发大规模的禽传染性支气管炎。此外，对于引进的鸡苗和种蛋等一定要经过检疫，无禽传染性支气管炎的鸡方可进行饲养，防止引入带毒鸡造成严重的经济损失。在鸡群接种疫苗后，要定期检测鸡群疫苗接种效果，确保疫苗接种的有效性。在日常养殖过程中，要提高对鸡群的监管意识，对疑似患禽传染性支气管炎的病鸡或已出现临床症状的鸡及时淘汰处理，同群鸡进行针对性的预防性治疗，避免鸡群由于禽传染性支气管炎病毒感染造成的损失。在诊断禽传染性支气管炎时应注意与其他有相似症状的疾病，如禽流感、传染性鼻炎等进行区分，最终诊断结果也应在实验室检测确定后方可确诊处理。
  5、结语
  自从二十世纪30 年代首次发现禽传染性支气管炎病毒以来，越来越多的新的禽传染性支气管炎病毒血清型被发现。缺乏有效的诊断方法和疫苗可以轻松应对多种禽传染性支气管炎病毒血清型造成的威胁，部分原因归咎于禽传染性支气管炎疾病造成的严重经济损失。病毒中和和病毒分离等常规检测方法已被广泛使用，但由于灵敏度和特异性以及时效性，这些检测方法已逐渐被新的灵敏和特异检测方法所取代，例如RT-PCR、RFLP 和qRT-PCR，能够快速进行基因分型和鉴定新的禽传染性支气管炎病毒毒株。相信在未来，会有更加高效和准确的禽传染性支气管炎病毒检测方法被研制出来。
  本文作者：王旺 / 河南省驻马店市遂平县农业农村局

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