猪圆环病毒-支原体二联疫苗免疫攻毒试验

2.3安乐死后的肺部病变评分由图6可知，诗圆静免疫组在免疫后3周即可产生对支原体强毒的高效保护，免疫后3周连续使用支原体强毒气管攻毒3次，在攻毒结束后4周所有猪只实施安乐死。诗圆静免疫组相比PBS对照组的肺部病变显著下降，诗圆静中的支原体免疫保护效果良好。

图6  肺部病变加权评分（P＜0.05）

3  讨论

本试验选取健康度良好且无特定病原感染的SPF猪做攻毒保证验证效果，通过使用PCV2d和M.hyo野毒强毒的分别攻毒，验证血清和重点组织中的病毒载量以及安乐死后肺部病变评分的对比，结果表明诗圆静免疫可以很好地保护仔猪免受PCV2d和M.hyo野毒感染造成的临床疾病的困扰。PCV2有8种亚型，当前世界范围内包括中国都以PCV2d亚型毒株为主，虽然诗圆静的圆环病毒抗原蛋白为杆状病毒表达的PCV2b亚型毒株的Cap蛋白，但亚型之间存在良好的交叉保护，诗圆静可以对PCV2d亚型产生良好的临床保护。

PCV2病毒血症是判断临床疾病状态的关键指标，试验中的评估指标科学、合理的反映了疫苗免疫的效果。M.hyo感染会引起肺部免疫系统剧烈的免疫应答，病原体通过分泌效应蛋白调动免疫细胞向感染的呼吸道尤其肺脏聚集，通过调节免疫细胞程序性死亡及破坏呼吸道黏膜完整性导致的碎片引起肺尖叶、心叶等部位发生肉样实变，形成显著的肺部损伤，严重影响肺脏气体交换功能。肺部病变评分是评估M.hyo疫苗效率最可靠的指标，单独的抗原、抗体监测无法与临床保护和疾病状态相关联。诗华开发的肺计划（CLP）肺部病变评分软件将Madec肺部病变评分法与智能软件结合，极大地提高了工作效率和数据存储、计算、对比和统计的能力，是评估M.hyo单苗及圆支二联疫苗的有力工具。

当然本试验还存在改进空间，可以设计得更加贴近生产实践。临床上呼吸道疾病的混合感染非常普遍，本试验仅考虑单一疾病在特定条件下的免疫保护，当多种病原混合感染造成复杂的肺部炎症环境，诗圆静的效力是否依然如此优越，需要投入更多的精力，设计试验进行进一步验证。在生产实践中，育肥猪上市屠宰时肺部病变评分可以确保疫苗评估试验的权威性和可靠性。

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