猪圆环病毒-支原体二联疫苗免疫攻毒试验

猪圆环病毒2型（PCV2）和猪肺炎支原体（M.hyo）是世界范围内影响猪群健康和给牧场带来严重经济损失的两种主要病原。PCV2是猪圆环病毒相关疾病（PCVD）的主要病原，感染可导致明显的临床症状如种猪繁殖障碍以及生长育肥猪生长迟缓、日增重降低、料重比升高，并发其他疾病，导致死亡率增加；也可能不表现症状，呈亚临床感染状态，导致猪群生长速度变慢，严重影响经济效益。M.hyo是猪慢性呼吸道疾病的主要病原，混合感染地方流行性的病毒或细菌又称地方流行性肺炎（EP）。单纯M.hyo感染虽然死亡率低，但发病率高，造成的呼吸道保护屏障破坏和免疫抑制加剧了多种病原的混合感染，损失巨大。其中以猪呼吸道疾病综合征（PRDC）广为人知。

疫苗免疫是控制上述两种疾病最经济、高效的手段。其中一种病原的感染都会为另一种病原的继发感染创造条件，生产实践中呼吸道疾病的发生通常伴随两种病原甚至更多种病原的混合感染。鉴于两种病原的疫苗免疫时间接近、具有互助增效的作用，PCV2-M.hyo二联疫苗可以减少注射次数，降低生物安全风险和免疫刺激，同时节省劳动力，为越来越多的猪场所采用。

本试验为验证圆支二联疫苗的免疫效果，在严格的生物安全条件下对免疫的SPF猪只分别进行PCV2d和M.hyo强毒株的攻毒，通过跟踪PCV2肺组织病毒载量、血清病毒载量以及腹股沟、肠系膜和纵膈淋巴结的病毒载量评估圆支二联疫苗对流行毒株PCV2d的保护效力；并通过跟踪攻毒后免疫猪只的肺部病变严重程度评估圆支二联疫苗对M.hyo流行强毒的免疫保护。

1  材料与方法

1?材料与方法

1.1 试验动物及材料

选择无猪蓝耳病毒（PRRSV）、PCV2、M.hyo、猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）等特定病原体的3周龄健康、体重相近的SPF仔猪60头为试验动物，开展试验，由法国诗华匈牙利费拉西亚工厂提供。试验用疫苗为法国诗华猪圆环支原体二联疫苗（诗圆静?，2 mL/头份）；对照组为PBS空白对照。

1.2 试验设计与分组

将60头3周龄仔猪，随机分为4组，组1为3周龄免疫诗圆静?2 mL，5周龄PCV2d鼻腔攻毒仔猪10头；组2为3周龄免疫PBS液2 mL，5周龄PCV2d鼻腔攻毒对照仔猪10头；组3为3周龄免疫诗圆静?2 mL，6周龄M.hyo强毒攻毒组仔猪20头；组4为3周龄PBS液2 mL，6周龄M.hyo强毒攻毒对照仔猪20头。

试验的具体分组情况见表1。

1.3 评估指标

1.3.1 观察、记录

1）PCV2d攻毒后每周采血监测血清中PCV2d的病毒血症，并加以记录。汇总后计算AUC曲线下面积，评估对比试验组和对照组病毒载量差异。

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