猪瘟、口蹄疫、高蓝分点免疫注射效果观察

    一、试验材料

    （一）疫苗 口蹄疫O型灭活苗，中牧股份兰州生物药厂生产；猪瘟细胞苗，乾元浩生物股份有限公司南京生物药厂生产；高致病性蓝耳病灭活苗，浙江易邦生物技术有限公司生产。

    （二）试验动物 选择猪瘟抗体在1:256～1:1024之间的11头健康长嘉或长大母猪所产的仔猪共130头。

    （三）诊断试剂 O型口蹄疫抗体液相阻断ELISA检测试剂盒，中国农科院兰州兽医研究所生产；猪瘟间接血凝诊断液及阳性血清，中国农科院兰州兽医研究所生产；猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测试剂盒（ELISA），北京爱德士元亨生物科技有限公司生产。

    二、试验方法

    （一）试验分组 将11窝共130头仔猪按窝随机分成试验组和对照组，试验组共93头，对照组共37头。试验组与对照组仔猪均为30日龄左右。

    （二）免疫方法

    试验组：三种疫苗同时分点免疫，猪左右颈部和腿部内侧或左右颈部肌肉分点注射高致病性猪口蹄疫、猪瘟和蓝耳病疫苗。免疫剂量：口蹄疫疫苗1ml/头，猪瘟疫苗2头份/头，高致病性蓝耳病灭活苗2ml/头。间隔28d重复免疫一次，免疫剂量：口蹄疫疫苗2ml/头，猪瘟疫苗4头份/头，高致病性蓝耳病灭活苗2ml/头。

    对照组：两种疫苗同时分点免疫，猪左右颈部和腿部内侧或左右颈部肌肉分点注射猪瘟和口蹄疫疫苗。免疫剂量：口蹄疫疫苗1ml/头，猪瘟疫苗2头份/头。间隔28天重复免疫一次，免疫剂量：口蹄疫疫苗2ml/头，猪瘟疫苗4头份/头。

    （三）临床不良反应观察 对猪进行免疫后，进行临床观察7～10天，观察猪只精神状况是否良好，采集是否正常，体温有无升高，是否有其它严重不良反应。

    （四）免疫抗体检测

    1.分别于首次免疫后28天（即二次免疫当天）及二次免疫后20天，随机抽取部分试验猪采血2ml，分离血清，进行O型口蹄疫、猪瘟、蓝耳病抗体检测，观察抗体水平消长情况。

    2. O型口蹄疫抗体检测：采用液相阻断ELISA（LpB-ELISA）方法，具体操作参照试剂盒说明书进行。判定标准：猪血清抗体滴度≥1:64，则判定被检血清O型口蹄疫抗体阳性；抗体滴度＜1:64，则判定被检血清O型口蹄疫抗体阴性。

    3.猪瘟抗体检测：采用间接血凝方法检测，具体操作参照NY/SY156-2000并略加改进。判定标准：抗体效价≥1:32，则判定被检血清猪瘟抗体阳性；抗体效价＜1:32，则判定被检血清猪瘟抗体阴性。

    4.蓝耳病抗体检测：采用ELISA方法，具体操作参照试剂盒说明书进行。判定标准：S/P值≥0.40，则判定被检血清蓝耳病抗体阳性；S/P值＜0.40，则判定被检血清蓝耳病抗体阴性。

    三结果

    （一）临床不良反应 除部分猪免疫当天及第二天体温稍有升高、食欲下降外，无其它不良反应。试验组与对照组无明显差异。

    （二）血清检测结果 第一次免疫后28天对56头试验猪采血，分离血清后进行口蹄疫O型、猪瘟及蓝耳病抗体检测；第二次免疫后20天对28头试验猪采血，分离血清后进行口蹄疫O型、猪瘟及蓝耳病抗体检测。检测结果见表1。

   表1  血清检测结果

    注：表中蓝耳病平均效价指各受检血清S/P值的数学平均值。

    从表1可见，口蹄疫O型抗体第一次免疫28d后与第二次免疫后20d效价差异不大，猪瘟抗体第二次免疫后效价明显上升，合格率也有所提高；蓝耳病抗体第一次免疫28d抗体均为阴性，S/P平均值仅为0.038，第二次免疫后20d合格率由0上升到67.86%，S/P平均值达到0.83，说明猪群对蓝耳病有了较强的抵抗力。

    四、结论

    1.口蹄疫O型、猪瘟和猪蓝耳病疫苗同时分点免疫注射，临床上无严重的不良反应。

    2.三种疫苗同时分点注射后，口蹄疫抗体群体合格率不高，平均效价也不高，免疫效价不佳；猪瘟抗体群体合格率较高，平均效价也较高，免疫效果较好；蓝耳病抗体群体合格率在第二次免疫前为0，第二次免疫后20d群体合格率较高，平均效价也较好，猪群免疫效果较好。

    五、讨论

    1.分析三种疫苗同时分点注射后抗体效价，是否意味着口蹄疫免疫受到干扰或抑制，有待于进一步试验和观察。

    2.蓝耳病抗体在第一次免疫后28d仍无一合格，尽管本次试验的数据偏少，但仍可看出蓝耳病疫苗一次免疫的效果不佳，或是产生抗体的时间较长（超出了试验观察的28d）。从本次试验结果看，蓝耳病疫苗要尽可能进行两次免疫，而且要二次免疫后一段时间才能产生较为坚强的保护力。

    3.本次试验由于时间较为仓促，未能对试验对照组进行抽样检测，对分点免疫注射后的抗体消长规律也未能进行较长时段和细致的观察，导致蓝耳病抗体究竟何时开始上升无法明确，这些有待于在以后的试验中进一步研究和观察。