表2 免疫组合对照组抗体检测结果 | 监测时间 | 免疫组 | 对照组 | | 检测数/只 | 阳性数/只 | 阳性率/% | 检测数/只 | 阳性数/只 | 阳性率/% | | 首次免疫前 | 308 | 7 | 2.27 | 171 | 4 | 2.34 | | 加强免疫强 | 296 | 258 | 87.16 | | | | | 免疫后2个月 | 296 | 294 | 99.32 | | | | | 免疫后6个月 | 292 | 273 | 93.49 | | | | | 免疫后9个月 | 288 | 249 | 86.46 | 164 | 13 | 7.93 | 表3 4个牧场的免疫抗体阳性率检测结果 单位:% | 分组 | 首次免疫前 | 加强免疫前 | 首次免疫后 | | 2个月 | 6个月 | 9个月 | | A组 | 免疫组 | 2.44(2/82) | 86.08(68/79) | 100(79/79) | 93.67(74/79) | 85.90(67/78) | | 对照组 | 2.00(1/50) | | | | 8.33(4/48) | | B组 | 免疫组 | 2.56(2/78) | 82.67(62/75) | 98.67(74/75) | 93.33(70/75) | 84.72(61/72) | | 对照组 | 4.55(2/44) | | | | 9.52(4/42) | | C组 | 免疫组 | 4.35(2/46) | 86.36(38/44) | 100(44/44) | 93.18(41/44) | 84.09(37/44) | | 对照组 | 4.35(1/23) | | | | 9.09(2/22) | | D组 | 免疫组 | 0.98(1/102) | 91.84(90/98) | 98.98(97/98) | 93.62(88/94) | 89.36(84/94) | | 对照组 | 0(0/54) | | | | 5.77(3/52) | 注:括号内数字为阳性数量/监测数量,单位为只 采用SPSS22.0软件,对试验开展9个月后4个牧场对照组的羊包虫病感染抗体阳性率进行卡方检验,发现P值均大于0.05,无显著性差异。 3 分析与讨论 免疫羊虽对本疫苗有轻微的免疫应激反应,但这可能是因为抓羊和免疫注射刺激导致的,,因此可认为疫苗的免疫副作用较小。本研究是为了验证疫苗的安全性及免疫效果,选择了8周龄左右的羔羊,这是因为此阶段羔羊感染包虫病的概率较低,有利于正确评价疫苗的免疫效果。因本级实验室不具备做虫卵攻击试验的条件,所以以抗体滴度来说明疫苗的保护效果。有报道称抗体滴度高低与疫苗保护强弱之间存在明显正相关关系 [3]因此,抗体滴度能够反映出疫苗的保护效果。 免疫抗体检测结果显示,免疫后抗体阳性率快速直线上升,加强免疫后1个月内,仍继续上升,但幅度变小,免疫9个月后,仍保持较高的抗体水平(图1),说明疫苗能够快速诱导羊机体产生免疫保护抗体,且加强免疫后,能维持较长时间。根据试剂盒说明,样品OD值介于0.3~0.6之间的,判为保护力低,免疫组加强免疫前的抗体合格率虽然达到了87.16%,但是抗体水平较低、保护力较低的样品占55%,所以首免后,间隔1个月进行加强免疫十分必要。 图1 抗体合格率变化趋势 对照组羊在试验开展9个月后,包虫病感染抗体阳性率上升为7.93%,与前期所做流行病学调查数据相符。4个牧场对照组包虫病感染抗体阳性率无显著差异,说明本研究做到了试验对象选定及分组的随机性。 本研究结果表明动物免疫后可以获得应有的保护,单由于时间有限,未能形成程序化的免疫程序,有待今后继续研究。 4 结论 试验数据显示,该包虫病基因工程亚单位疫苗具有良好的安全性和免疫效果,按照说明书中的免疫程序对羔羊进行免疫,9个月后动物个体仍维持较高的抗体水平。试验结果表明,该疫苗对羊包虫病具有较好保护力,可以在包虫病流行区推广应用。
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