中国造猪瘟疫苗世界领先，克服了牛病毒性腹泻病毒污染！

      由于BVDV分为3个基因型，且不同基因型之间的基因同源性也较低，因此可以在BVDV的5’非编码区域设计引物位点；第三，单纯通过RT-PCR进行BVDV的外源病毒检测还达不到猪瘟活疫苗的外源病毒检测标准，必须建立荧光定量RT-PCR方法，且探针的荧光标记基团必须使用特异性更好的MGB探针做为标记才能在提高检测引物的灵敏度（BVDV的最低检测剂量）的同时能够做到对CSFV的鉴别检验，避免做到猪瘟活疫苗产品中BVDV外源病毒检测中对猪瘟活疫苗的非特异性扩增。

图1 猪瘟活疫苗BVDV荧光定量RT-PCR扩增曲线图

图2 RT-PCR检测结果显示4批稳常佳未检出BVDV

1：稳常佳2016040批；2：稳常佳2016045批；3：稳常佳2016046批；4：2016047批 阴性：阴性对照 阳性：阳性对照

      而据岳丰雄介绍，成都天邦目前已经建立起这种方法，经不同样品（猪瘟脾淋苗和细胞苗中加入不同病毒含量的BVDV）的反复检测验证，该检测方法具有很好的灵敏度，能够在猪瘟活疫苗中检测出极低剂量的BVDV外源病毒污染，且对猪瘟病毒无非特异性的扩增。精确度可以达到1.5个TCID50，不会把疫苗中的猪瘟病毒“误检”为BVDV，也不会造成对猪瘟疫苗中BVDV的“漏检”。

并且，成都天邦按照现行《中国兽药典》对活疫苗BVDV外源病毒进行检测外，同时利用建立BVDV荧光定量RT-PCR方法对活疫苗（尤其是猪瘟活苗）生产过程中的血清等原辅料以及半成品、成品进行快速检测，保证了活疫苗产品的BVDV外源病毒检测阴性。

      岳丰雄还介绍，实际上早在2013年开始，天邦就将BVDV的检测和清除方法的建立、与CSFV悬浮培养工艺开发、TCID50评活病毒含量测定价方法共同提上研发日程，经过2年的实验和反复验证，终于建立了以上成熟的BVDV检测方法。这对猪瘟疫苗的原料控制和猪瘟疫苗成品控制都有重要意义，有助于更好的控制猪瘟活疫苗中的BVDV外源病毒污染。

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