二、猪伪狂犬病毒疫苗的未来展望
随着生物技术的发展与进步，以及基因工程疫苗研究的不断发展与创新，基因工程疫苗已开始广泛进入实际生产与应用。目前，新型的基因工程疫苗也得到了更深入的研究，并且将成为生物制品产业发展的一种必然趋势。
1、PRV作为载体表达外源性抗原
PRV基因组大，存在许多插入位点可用于整合和表达外源基因。因此，PRV已经被开发成有力的载体系统用于表达外源蛋白来同时免疫两种或多种动物传染性疾病。据报道，PRV已被用来表达了寄生虫、细菌和病毒蛋白的基因。随后，用于重大动物疫病，如猪瘟、猪流感、口蹄疫、猪细小病毒病等控制的重组PRV也有研究报道。
2、PRV候选疫苗的其他骨架
尽管PRV本身是一个表达外源抗原的良好载体，PRV基因还可以插入到其他病毒载体中表达作为疫苗。例如，腺病毒是理想的病毒载体，因为腺病毒能感染分裂细胞和不可分裂细胞，外源基因容量大，细胞培养产生高滴度的重组病毒相对容易。具有复制缺陷的腺病毒表达的PRV gB蛋白已被证实在小鼠模型中能够诱导产生抵抗致病毒致死性攻击的保护性免疫。另一个表达系统是杆状病毒，现已被广泛用于表达重组蛋白作为疫苗。研究表明利用杆状病毒表达PRV的gB、gC和gD能够引起抵抗PRV攻击的保护性免疫。另外，也有报道用猪痘病毒和羊痘病毒作为载体来表达PRV蛋白。CRISPR/Cas9系统的应用为基因工程研究领域带来了深刻变革，该技术现已被用来研发针对新出现的PRV的重组疫苗。
3、DNA疫苗
PRV糖蛋白可以诱导产生强烈的免疫反应。因此，由编码这些糖蛋白的质粒组成的DNA疫苗可以预防PRV。DNA疫苗具有许多优点：易于构建和规范质粒产品；无需操作感染性微粒；能够诱导体液免疫和细胞免疫。许多研究证明用DNA疫苗抵抗PRV将是一个有效的策略。然而这些研究中的伪狂犬病毒DNA疫苗还没有商业化。
4、PRV疫苗应用的替代途径
当首次报道用滴鼻的方式免疫gE缺失疫苗可以起到更好的保护效果后，该免疫方式很快被采纳，采用滴鼻免疫可以避免新生猪仔中母源抗体对修饰活病毒疫苗的干扰。皮下注射的疫苗能够靶向传递至表皮和真皮的抗原递呈细胞，研究表明皮下注射PRV糖蛋白能够刺激皮肤的先天免疫和产生保护性的呼吸道免疫。口服免疫在欧洲被用来控制野猪的猪瘟病，由于PRV在野猪群体中也呈现地方性流行，实验发现口服弱毒活疫苗进行免疫能够保护野猪和家猪抵御PRV野毒株的感染。同时，研究证明gE缺失重组PRV毒株通过饵料的形式提供给仔猪是安全的，且具有免疫原性。
伪狂犬病毒虽然在过去的十几年时间里依靠基因缺失疫苗的应用得到有效的控制，但是近年来伪狂犬在各个地区时常有所发生。对PRV侵袭机体突破疫苗产生免疫防护机制的研究仍然需要深入。由于PRV作为载体可以同时插入多个外源基因，有望实现一针防治多病的目的，进而作为未来疫苗研制与开发的热点和主要方向之一。
基因修饰PRV活疫苗已广泛用于商业疫苗，然而到目前为止还没有PRV载体病毒得到应用。没有得到商业化有以下几个原因：可用的疫苗已经被证明它们的安全性、免疫原性和有效性，而没有必要改变成高科技产品；有效的疫苗产品需要较高的病毒滴度，而重组病毒不一定满足该条件；先前存在的对PRV的抵抗力可能会限制PRV病毒骨架的实用性。另外一个需要考虑的因素是PRV骨架在非靶物种上潜在的残余致病性，特别是肉食动物。最高程度致弱的PRV骨架，如TK和gE双缺失的PRV毒株可用于研究CSFV/PRV重组疫苗。PRV载体疫苗的另一可能的研究方向是可作为预防细菌感染的替代策略，以减少抗生素的使用和细菌抗药性的发展。
|
