11、国标中规定的新城疫诊断方法有哪些? 答:临床诊断、病毒分离与鉴定、血凝试验、血凝抑制试验、反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)。 12、按国标规定,新城疫RT-PCR检测呈阳性后,还应对RT-PCR产物进行序列测定和分析,才能判定为强毒,而非疫苗毒? 答:对毒株的F基因编码的氨基酸序列进行分析,分离毒株F1蛋白N末端117位为苯丙氨酸,F2蛋白C末端有“多个碱性氨基酸残基”。 13、布鲁氏菌病血清学监测中,筛选检测、复核各采用什么试验方法? 答:筛选检测用琥红平板凝集试验;阳性样品用试管凝集反应或补体结合试验进行复核。 14、血吸虫病用什么试验方法进行监测? 答:用间接血凝方法或Dot-ELISA方法检测,结果为阳性的,用粪检法复检,仍为阳性的确诊为阳性畜。 15、狂犬病病毒和抗体常用什么试验方法进行监测? 答:(1)病毒检测:脑组织以直接免疫荧光或RT-PCR进行检测。(2)抗体检测:ELISA方法、免疫荧光灶抑制试验。 16、J亚群鸡白血病有哪些实验室诊断方法? 答:(1)病原分离鉴定;(2)组织病理学诊断;(3)酶联免疫吸附试验。 17、高致病性猪蓝耳病的病原监测采用什么试验方法?其与经典猪蓝耳病鉴别的原理是什么? 答:RT-PCR或荧光定量PCR。针对猪蓝耳病病毒的NSP2基因的特征性缺失进行鉴别检测。 18、猪瘟的监测方法有哪些? 答:免疫抗体监测:(1)方法:正向间接血凝试验。(2)判定:免疫21天抗体效价≥25为免疫合格。 病原学检测:用荧光免疫抗体或RT-PCR或ELISA方法,对流产、死胎及以高热为特征的死亡病例进行病原学检测。 19、鸡新城疫的监测方法有哪些?判定标准是怎样的? 答:免疫抗体监测方法、判定标准(1)方法:血凝抑制试验。(2)判定:免疫21天抗体效价≥25为免疫合格。 用RT-PCR鉴定方法进行病原学检测。病毒检测:RT-PCR方法结合核酸序列测定。抗体检测:ELISA方法。 20、猪蓝耳病的实验室诊断方法有哪些? 答:(1)病毒分离与鉴定;(2)免疫过氧化物酶单层试验(IPMA);(3)间接免疫荧光试验(IFA);(4)间接ELISA;(5)RT-PCR及荧光RT-PCR。 D、问答题 1、按照GB/T 18936-2003高致病性禽流感诊断技术,简述禽流感病毒的鉴定步骤。 答:(1)A型流感病毒的型特异性鉴定:用具有血凝活性鸡胚的绒毛尿囊膜(CAM)制成抗原,与A型禽流感病毒标准阳性血清进行AGID试验,检测样品中是否含有A型流感病毒。 (2)血凝素亚型鉴定:用禽流感病毒15种血凝素(H1-H15)亚型分型血清,采用HA-Hl试验方法,对样品进行病毒亚型鉴定。 2、请写出下列英文简称的含义:HA、HI、IHA、ELISA、PCR、RT-PCR 、AGIP 、CF、VN、HAU、ICPI、IVPI、TCID50。 答:HA:血凝、HI:血凝抑制、IHA:间接血凝抑制、ELISA:酶联免疫吸附试验、CF:补体结合试验、VN:病毒中和试验、HAU:血凝单位、PCR:聚合酶链反应、RT-PCR:反转录-聚合酶链反应、AGIP:琼脂凝胶免疫扩散试验、ICPI:脑内接种致病指数、IVPI:静脉接种致病指数、TCID50:半数组织培养感染量。
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