时间：2015-02-13 点击： 次 来源：阳光畜牧网 作者：阳光畜牧网 - 小 + 大
3.2实验室诊断 首先，利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各阶段猪血清是否感染伪狂犬野毒。而后，采集发病猪的大脑、肺、脾、淋巴结，混合后采用PCR检测是否感染伪狂病毒。值得注意的是，采集病料进行PCR检测，必须是近3周内没有接种伪狂犬弱毒疫苗的猪，有的猪场3日龄内滴鼻接种，接种后几天取病料进行PCR检测，检测到的病毒可能是疫苗毒，从而造成误诊。 3.3 动物接种 3.3.1将出现典型症状的病猪的脑、脾等混合、磨碎后，加生理盐水制成1∶10的悬液，离心、取上清液2毫升，加青霉素、链霉素给家兔皮下接种，经2~3天后，家兔体温升高，继而注射部位奇痒、脱毛、出血，肌肉痉挛，角弓反张，最后死亡，可作为伪狂犬病诊断依据。 3.3.2 用以上方法制备上清液2毫升，皮下接种小狗或将出现典型症状病猪的脑、脾等混合饲喂小狗，经3~4天后，小狗出现厌食、精神沉郁，肌肉震颤，角弓反张，最后死亡，可作为伪狂犬病诊断依据。 4 猪伪狂犬疫苗作用特点 猪伪狂疫苗作用特点：①能减轻临床症状，伪狂犬野毒感染的场，在高水平抗体下，症状不明显，经济损失减少，但抗体水平低时，在应激因素下，会激发本病发生，出现明显临床症状，经济损失严重。②可在高水平母源抗体下保护新生仔猪，抑制病毒入侵和扩散。③可抑制伪狂犬野毒在中枢神经系统的复制，减少排毒，减少病毒传播、潜伏感染和反复感染的机会。但是疫苗不是万能的，它不能完全阻止野毒的散毒，不能使野毒株转阴，低水平抗体不能完全阻止病毒入侵，而且如果野毒已经感染占位，在接种疫苗，免疫效果很差，这就解释了为什么有的猪场接种了猪伪狂犬疫苗仍然会发生伪狂犬病。 市场上现有的猪伪狂犬疫苗毒株主要有Bartha-K61株单基因缺失疫苗（gE基因缺失毒株）和HB-98株多基因缺失苗（同时缺失TK基因，gG基因）。目前国际上及国内大多数伪狂犬疫苗生产厂家都用Bartha-K61株，如主要有海利（伪可净）、哈维科、永顺、硕腾、勃林格、海博莱等，HB-98株的厂家较少，主要有科前和中牧。 Bartha-K61株疫苗缺失gE糖蛋白，gE抗蛋白在伪狂犬病毒对神经系统侵入起关键作用，去除gE基因，伪狂犬病毒则不能侵入神经系统，该苗能区分是否是野毒感染。若免疫后血清中出现gE抗体，说明感染了野毒，所以Bartha-K61株疫苗安全性高和有效性好，受到国际兽医广泛认可，并最终为实现欧美猪场伪狂犬病毒的净化，使我国猪场狂犬病得到了很好的控制。但在目前高感染压力下，尤其是野毒阳性场，需要做好定期监测，及时调整免疫程序，加大免疫剂量（抗原量）和免疫次数，能很好控制本病发生。 5 猪伪狂犬病免疫监测及免疫防控 种群和中大猪是目前伪狂犬病野毒潜伏感染两大主要带毒群体，具有高度神经潜伏感染、持久排毒和优先占位的感染特点。因此，防控伪狂犬病发生的四大关键：一是不引进野毒阳性后备猪，淘汰种群野毒阳性种猪；二是断奶后隔离饲养（二点式），防止生长育肥带毒猪循环感染种群；三是初生仔猪尽快在1日龄鼻内接种弱毒苗，尽快占位；四是定期检测抗体，调整免疫程序，加大免疫剂量和免疫次数，防止出现免疫空档。 5.1加强种猪伪狂犬病免疫监测与免疫接种 主要做到：一是加强原种猪场种猪野毒净化工作；二是引种或留种的后备猪，需要隔离10周，引入时和进人种群前检测2次野毒gE抗体，并淘汰野毒阳性猪只。三是对现有全部种猪进行检测，猪群净化，种猪群gE野毒阳性率低于10%，ELISA或免疫荧光(IE)技术一次性检测，坚决淘汰gE野毒阳性种猪，特别是公猪，一个月后重复1次，以后每季度抽样检测；种猪gE野毒阳性率高于10%，每批断奶后进行检测淘汰。四是免疫后做好抽样检测疫苗gB抗体。对注射疫苗后检测gB抗体水平不合格的种猪应及时补种疫苗，如果补种疫苗后gB抗体水平仍不合格的猪只，可以疑为免疫抑制或免疫耐受猪只，要坚决淘汰，杜绝可能的传染源。 推荐疫苗接种方法：阴性猪场或野毒阳性率低于10%的猪场，4次/年；野毒阳性率高于10%的猪场：3次/年；后备猪种配种前免疫2次；每次2头份。 |
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