6 实验方法
6.1 抗原血凝效价测定（HA试验，微量法）
操作方法按GB/T18936执行。
6.2 血凝抑制（HI）试验（微量法）
6.2.1 卵黄直接稀释测定法
操作方法按GB/T18936执行。用5.3.1中制备的卵黄检样代替血清进行检测。检测时设标准阳性血清和阴性血清对照。
6.2.2 卵黄氯仿萃取测定法
6.2.2.1 适用范围
在卵黄直接稀释测定法检测出现“跳管”或测不出抗体时，采用卵黄氯仿萃取法检测。
6.2.2.2 方法
操作方法按GB/T18936执行。用5.3.2中制备的检样代替血清进行检测。检测时设标准阳性血清和阴性血清对照。
7 结果判定
7.1 试验结果成立条件
只有阴性对照孔血清滴度不大于22，阳性对照孔血清误差不超过1个滴度，试验结果才有效。
7.2 HI滴度的计算方法
以完全抑制4个HAU抗原的样本最高稀释倍数作为HI滴度。样本制备过程中卵黄的稀释倍数和加入氯仿量都计入该样本的稀释倍数。
7.3 判定方法
7.3.1 卵黄直接稀释测定法结果判定
将“检样制备”过程中样本的稀释倍数计入终点滴度判定，即：微量反应板上血凝抑制的终点滴度加一个滴度为该样本的HI抗体效价（终点滴度为零时则不再加）。举例：微量反应板上血凝抑制的终点滴度是27，则该样本HI抗体效价为28。
7.3.2 卵黄氯仿萃取测定法结果判定
将“检样制备”过程中样本的稀释倍数计入终点滴度判定，即：微量反应板上血凝抑制的终点滴度加两个滴度为该样本的HI抗体效价（终点滴度为零时则不再加）。举例：微量反应板上血凝抑制的终点滴度是27，则该样本HI抗体效价为29。
8 免疫抗体合格判定
8.1 个体合格判定
样本HI抗体效价大于等于24为免疫合格。
8.2 群体合格判定
免疫合格样本数占检测总样本数70%以上（包括70%）判为群体合格。
河北省地方标准DB13/ 946—2008
|
