３讨论
小反刍兽疫活疫苗生产用毒株为Ｎｉｇｅｒｉａ ７５／１毒株，该毒株属于ＰＰＲＶ Ⅰ型，通过Ｖｅｒｏ细胞连续传代后致弱，据资料报道，该毒株可交叉保护其他群毒株的攻击，且无副作用，但对热敏感，稳定性较差。本实验室对该毒株克隆、纯化后进行无菌、安全、病毒含量等检验，建立了符合生产要求的种子批，并用于疫苗生产，所生产疫苗经检验均符合小反刍兽疫活疫苗质量标准。小反刍兽疫为国际兽医局（ＯＩＥ）规定的Ａ类烈性传染病，对病原操作需要严格的生物安全措施，且目前我国内陆地区尚无该疫病发生的报道，故在国内进行ＰＰＲＶ攻毒保护试验的难度和风险均较大。因此在ＰＰＲ活疫苗效力评价的研究过程中，采用ＯＩＥ关于ＰＰＲ活疫苗效力判定标准进行评价，即健康易感山羊免疫疫苗后２１～２８ｄ，其血清中和抗体水平１００％不低于１∶１０为合格。
最小免疫剂量研究结果表明，除１０３ＴＣＩＤ５０／只的免疫剂量组（共１５只免疫羊）有 １只免疫羊中和抗体滴度小于１∶１０外，其余按１０２ＴＣＩＤ５０／只以上剂量免疫的羊，均可产生１００％有效保护，且山羊产生的抗体水平显著高于绵羊产生的抗体水平，说明ＰＰＲ对动物的感染具有品种的倾向性。因ＰＰＲＶ对热敏感，不利于田间运输，为确保免疫效果，将最小免疫剂量确定为１０３ＴＣＩＤ５０／头份。本试验未对血清中和抗体小于１∶１０的羊进行原因分析，但有研究表明，血清中和抗体滴度小于１：１０的免疫羊仍可以抵挡住异源强毒的攻击。
本试验的免疫期试验结合临床试验进行，与疫苗田间使用情况更为接近，可以更为直观的评价疫苗的实际应用效果。免疫期研究结果表明，按疫苗最小免疫剂量免疫后２６个月，抗体合格率仍保持在８５％以上，表明该疫苗的免疫期至少为２６个月，这与ＯＩＥ规定ＰＰＲ活疫苗的免疫期限相一致。该免疫期对多数羊而言为终身免疫，每年只需对新生羊进行补免即可，减少了基层兽医人员的工作强度，确保了疫苗的免疫效果。保存期研究表明，疫苗在－２０℃保存１５个月后免疫山羊，免疫后２８ｄ中和抗体１００％大于１∶１０，表明该疫苗的保护剂对ＰＰＲＶ提供了良好的保护作用，克服了ＰＰＲＶ稳定性差的问题，确保疫苗稳定、长期、有效保存，最终确定该疫苗保存期为－２０℃保存１２个月。研究数据表明，该疫苗免疫原性好，免疫期长，对山羊和绵羊均可提供良好保护。
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