郭孝萍
（金宇保灵生物药品有限公司，内蒙古 呼和浩特市 010030） 摘要：悬浮培养技术是指细胞在生物反应器中自由悬浮于培养液内生长增殖的一种培养方法。金宇保灵生物药品有限公司于2009年成功将悬浮培养技术用于口蹄疫疫苗的生产，并通过农业部兽药评审中心专家评审，获得正式生产文号。笔者作为该公司质量监控员，经历了由传统生产工艺到悬浮培养工艺质量监控的巨大变化，切身感受到采用此技术使产品质量有了质的提升、生产能力大幅提高、人员工作强度明显下降，同时对于采用新生产工艺的质量监控也提出了新的要求。
关键词：口蹄疫 悬浮培养 质量监控 悬浮培养工艺是时下我国主要生物制品企业特别是动物用生物制品企业研发的主要趋势。金宇保灵生物药品有限公司通过不断进行研发和技术创新，通过与国际、国内权威科研院所全面合作，实现了5L、30L、100L、500L、1000L的跨越，将细胞悬浮培养技术正式引入口蹄疫疫苗生产工艺。使用全自动生物反应器悬浮培养BHK21细胞，细胞密度、生产工艺、产品质量均实现飞跃。
序---悬浮培养的基本知识
物细胞培养工艺主要有贴壁培养、悬浮培养和固定培养三种。
细胞悬浮培养是指细胞在反应器中自由悬浮生长的过程。
微载体培养的显著特点
表面积大，单位体积培养液的细胞产量高；细胞生产封闭均一，方便监测和控制各种环境因素，可用普通显微镜就可观察细胞在微载体上的生产情况；重复性好，收获过程不复杂；放大容易，劳动强度小，占用空间较小；适合于分批培养、培养、灌注培养等培养方式。
细胞反应器高密度培养的主要方式有以下三种
分批培养（batch culture）
指将细胞和培养液一次性装入反应器内，进行培养，细胞不断生产，产物也不断形成，经过一段时间后，将整个反应系取出。
流加培养(fed-batch culture)
指先将一定量的培养液装入反应器，在适宜条件下接种细胞，进行培养，细胞不断生产，产物也不断形成，随着细胞对营养物质的不断消耗，新的营养成分不断补充至反应器内，使细胞进一步生产代谢，到反应终止时取出整个反应系。
灌注培养(perfusion culture)
指将细胞种子和培养液一丐加入器内进行培养。一方面，新鲜培养液不断加入反应器内，另一方面，又将反应液连续不断地取出，使反应条件处于一种恒定状态之下，使培养过程得以连续进行。
1、采用悬浮培养生产工艺质量监控的主要措施
1.1监控人员要从心理认识上改变传统监控方式
原来我公司也像行业内的其他企业一样，全部采用传统工艺--转瓶培养的生产工艺。此种工艺多为半开放、多断点、人工操作，作为一名质量监控人员，更多关注的对于人的监控，多关注于表面上、可见的违规操作、环境污染，多为结果式的监控。它所造成最大弊端是由于缺少过程控制以致出现产品质量问题，对于过程的追溯会无从下手，无法追本溯源。
悬浮培养工艺由于采用的是管道化的工艺，对于过程的监控决定于结果。因此，要求我们监控人员要尽快熟悉工艺流程，改变监控思维，变结果式的监控为过程式的监控，要更多关注对于操作规程的执行上，对关键设备的操作上。作为生产一线的员工，其常年累月地从事生产工作，对于操作规程更是早就成竹在胸，这样会在无形中形成思维定势，而且会在操作中，会出现“我闭着眼睛也会操作”、“不用看规程我也会操作”等涣散心理，特别是对于某段生产工艺出现误差或错误后，由于悬浮培养采用程序化、管理化会使错误影响下流工艺甚至全部生产流程，进而影响到最终产品质量。因此，对于悬浮培养工艺的监控要注意细节、注意关键点，要防微杜渐。我们的具体做法是，对于生产操作规程必须有两人同时在场方可进行操作，其中一人负责大声朗读生产规程，另一人在朗读规程的同时，并执行操作步骤。 减少误差，减少失误。
|
