悬浮培养工艺与转瓶培养工艺的比较分析

时间：2013-07-11 点击：次来源：阳光畜牧网作者：阳光畜牧网 - 小 + 大

培养条件和结果对比见表1。

表1 转瓶培养和反应器全悬浮培养BHK21细胞对比

项目	转瓶培养	反应器悬浮培养
培养体积（L）	1.5	500
细胞培养基	低血清培养基	无血清培养基
血清使用量	5%	0
细胞生长状态	贴壁生长	全悬浮生长
培养工艺	单瓶培养	批培养
细胞接种密度（cells/ml）及细胞活率	0.25×10⁶	0.5×10⁶/96%
细胞密度（cells/ml）及细胞活率（48hr）	2.5 x 10⁶	2.5×10⁶/97%
细胞密度（cells/ml）及细胞活率（72hr）	3.5 x 10⁶	3.9×10⁶/95%
细胞密度（cells/ml）及细胞活率（96hr）	细胞开始出现脱落	5.4×10⁶/94%

图1 转瓶BHK21细胞低血清培养48hr，100X

图2 反应器全悬浮无血清培养48hr，100X

结果显示，转瓶培养的BHK21细胞，培养48小时显微镜观察成致密单层，见图1，96小时细胞开始出现脱落死亡；反应器无血清全悬浮培养BHK21细胞48小时的细胞显微镜观察状态如图2，生长至96小时细胞密度可达5.4x106cells/ml，活率维持在94%左右。从细胞数量比较，650L反应器培养一批的细胞数量相当于500～700个15L转瓶培养的细胞总量。

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