时间:2013-07-04 点击: 次 来源:阳光畜牧网 作者:阳光畜牧网 - 小 + 大
2. 血液的采集及保存 血液的采集目前主要分为封闭式采集和开放式采集2种方法。 封闭式采集依赖于一次性无菌商品血袋,该血袋连有采血针,因血液在采集过程中完全没有机会暴露在空气下,故称为封闭式采集法。在目前普遍使用的血袋中,生产商已经放入了抗凝保护剂,主要有枸橼酸磷酸葡萄糖(CPD)、枸橼酸磷酸葡萄糖腺嘌呤(CPD-A1)和酸性枸橼酸葡萄糖(ACD)等。抗凝剂能保证血液处于液态,也能保护营养血液中的红细胞和其他细胞成分,延长血液制品的保存时间。因为商品血袋的采血量和其中含有的抗凝保护剂是严格按照一定比例计算的,所以采血时也应严格按照血袋的规格采血。如果需要采集的血量少于血袋规格,可以按比例抽离血袋中的抗凝保护剂。 开放式采集方法是指血液在采集、处理或储存过程中,总有一个部分是暴露于外界空气中,例如用含有抗凝剂(肝素或柠檬酸钠)的注射器采血。注射器中的抗凝剂应在采集前准备好,且应严格按照全血∶抗凝剂为9∶1的比例准备,抗凝剂过多会导致输血后受血者的凝血功能异常,而过少则会导致血液凝集。开放式采集法主要适用于小剂量输血的情况。使用开放系统采集的血液必须遵循以下要求:如果其储存在22 ~ 25℃,必须在采血后4h之内使用;如果其储存在1~6℃,必须在采血后24h内使用。 另外,在血液的采集、处理和储存过程中还必须注意以下几点:①采血前应将供血犬的采血部位剃毛消毒,以防止细菌进入血液制品中。②肝素会使血小板失活,所以当输血的目的是补充血小板时,血液的采集应选用枸橼酸钠作为抗凝剂。③使用商品采血袋前,应检查该血袋是否还在保质期内,超过保质期则不能使用。④猫血液的采集常用开放式采集法采集。 3. 交叉配血试验(Cross-Matching) 交叉配血试验是输注血液制品前必须进行的一项试验,尤其是当受血动物曾接受过输血或有妊娠史的情况。 配血试验是将供血者的红细胞和血浆与受血者的红细胞和血浆交叉反应的试验,分为主侧配血试验和次侧配血试验两个部分。主侧配血是观测供血动物的红细胞与受血动物的血清(或血浆)是否发生凝集反应或溶血反应,目的是检测受血者血清中是否存在能凝集或溶解供血者红细胞的抗体,在输注含有红细胞的血液制品时尤为重要;次侧配血是观测供血动物的血清(或血浆)与受血动物的红细是否发生凝集反应或溶血反应,目的是检测供血者的血浆中是否存在能直接抗受血者红细胞的抗体,在输注含有血浆的血液制品时尤为重要。 若主侧配血和次侧配血均不出现凝集(或溶血),则说明受血动物和供血动物的血型相配,可以输注。若主侧配血出现凝集(或溶血),则说明两个动物血型不合,绝对不可以输入。若主侧配血不发生凝集,次侧配血发生凝集,可适当少量且缓慢地输血,并在输血过程中密切观察,如发生输血反应,应立即停止输注。由于犬作为受血动物血液中极少含有天然抗体,故在第一次输血时可不做次侧配血试验。 交叉配血试验有多种方法,最常用且较为可靠的是盐水法,步骤如下: (1)分别抽取供血犬和受血犬的新鲜血液,用EDTA抗凝。 (2)用0.9%氯化钠溶液轻轻吹洗3遍红细胞,分别以1000rpm离心15s,去掉上清液。 (3)将红细胞泥配成4%红细胞盐水悬液。 (4)主侧配血:取两滴供血动物红细胞盐水悬液和两滴受血动物血清(或血浆),滴在洁净的载玻片上,上下左右晃动玻片30min使血液混合充分混合。 次侧配血:取两滴受血动物红细胞盐水悬液和两滴供血动物血清(或血浆),滴在洁净的载玻片上,上下左右晃动玻片30 min使血液混合充分混合。 (5)先用肉眼观察玻片上是否出现凝集反应,再在镜下观察红细胞是否凝集成团或溶血,以凝集“-”、“+”、“++”表示不同的凝集程度,“-”表示未出现凝集;“+”表示肉眼观察玻片上无凝集,镜下可见凝集;“++”表示肉眼和镜下均见凝集。 (6)若主侧配血出现“+”、“++”的凝集反应,则说明此供血动物和受血动物血型不相配,应重新选择供血动物;若次侧配血出现“++”的凝集反应,则说明此供血动物和受血动物血型不相配,应重新选择供血动物;若次侧配血出现“+”的凝集反应,则可以缓慢且少量的输血,并实时观测输血状况。 4. 输血方法 4.1 输血途径 可供输血的途径有经静脉、经动脉、经腹腔、经皮下和经骨髓等,临床上以静脉输血为主,但应根据需要选择不同的输血途径。当静脉无法输血时,可以考虑选择经骨髓输血,例如为幼犬输血;当治疗慢性贫血时,可以考虑选择经腹腔输血,因为腹腔输血红细胞的吸收速度较慢,能持续48h为机体缓慢补充红细胞,但应注意腹腔输血有发生腹膜炎的潜在风险。 4.2 输血量 当一只犬或猫需要输血时,其输血量往往应从多个方面进行考虑,如失血量、失血速度、是否存在活动性出血以及心肺功能、肾功能是否正常。如果该病例心肺功能及肾脏功能正常,则可以根据红细胞压积和体重计算需要输注的量,每千克体重输入2.2mL的全血可以提升1%的红细胞压积;如果该病例仍有活动性出血点,则应酌情增加输血量;如果该病例心肺功能和肾功能不足,则应选择输注量少、负荷低但能有效增加携氧能力的血液制品,如浓缩红细胞。 |
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