动物布鲁氏菌病诊断技术标准

4.3.2.3　牛、马、鹿、骆驼1：50血清稀释，猪、山羊、绵羊、狗1：25血清稀释，出现“++”以上凝集现象时，受检血清判定为可疑反应。

可疑反应家畜经3周一4周后重检，如果仍为可疑，该牛、羊判为阳性。猪和马经重检仍保持可疑水平，而农场的牲畜没有临床症状和大批阳性患畜出现，该畜被判为阴性。

猪血清偶有非特异性反应，须结合流行病学调查判定，必要时应配合补体结合试验和鉴别诊断，排除耶森氏菌交叉凝集反应。

5　动物布病补体结合试验

5.1　材料准备

5.1.1 稀释液：0.85％生理盐水按常规方法配制。

5.1.2 绵羊红细胞悬液：采取成年公绵羊血，按常规方法脱纤、洗涤、离心，用稀释液洗涤3—4次，最后二次以2000r/min离心沉淀lOmin，取下沉的红细胞泥，以稀释液配制成2.5％红细胞悬液。

5.1.3 抗原、标准阳性血清、阴性血清、溶血素由制标单位提供，按说明书使用。

5.1.4 受检血清：收集和处理见附录A(标准的附录)。

5.1.5 溶血素：效价测定见附录B(标准的附录)。

5.1.6 补体：采集及其效价测定方法见附录C(标准的附录)。

5.1.7 抗原：效价测定见附录D(标准的附录)。

5.2　操作方法

5.1.7.1 将1：10稀释经灭能(见附录A)的受检血清加入2支三分管内，每管0.5mL。

5.1.7.2 其中一管加工作量抗原0.5mL，另一管加稀释液0.5mL。

5.1.7.3 上述2管均加工作量补体，每管0.5mL，振荡混匀。

5.1.7.4 置37℃一38℃水浴20min，取出放于室温(22℃一25℃)。

5.1.7.5 每管各加2单位的溶血素0.5mL和2.5％红细胞悬液0.5mL。充分振荡混匀。

5.1.7.6 再置37℃一38℃水浴20min，之后取出立即进行第一次判定。

5.1.7.7 每次试验需设阳性血清、阴性血清、抗原、溶血素和补体对照。

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