时间:2011-07-17 点击: 次 来源:阳光畜牧网 作者:阳光畜牧网 - 小 + 大
(六)分子生物学诊断 王宏俊等[28]采用地高辛标记的cDNA为探针建立核酸探针检测CDV的方法,该方法特异性强、灵敏度高(0.1pg),临床初步应用结果表明该方法完全使用于临床检测。Frisk A L等[29]用RT-PCR方法检测临床疑似病例样品中的犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因,实验结果显示:尽管所选取的引物的位置对RT-PCR的敏感性有很大的影响,但是这种核酸检测系统在对犬瘟热的生前诊断中表现出高度的特异性和敏感性。刘彩玉等根据GenBank中犬瘟热病毒H基因保守序列设计合成了内(FIP,BIP)、外(F3,B3)2对引物。通过对反应条件中内、外引物的比例、dNTP浓度、Mg2+浓度、反应温度和时间等条件逐一优化,成功建立了犬瘟热病毒的RT-LAMP检测方法。该方法与常规RT-PCR检测方法相比灵敏度高100倍[30]。 六、防治 在CD的预防与治疗时,要考虑细胞免疫与体液免疫两方面的因素。 (一)预防 CDV灭活苗或麻疹病毒疫苗都不能提供动物持久的免疫力[31],目前用于犬和经济动物的疫苗基本上是弱毒疫苗。但是弱毒疫苗的不足之处是热不稳定,对某些免疫缺陷幼犬和野生食肉动物的不安全性以及发生变态反应等,因此,人们已开始使用新技术研制新型疫苗,包括基因工程亚单位苗、重组病毒苗[32]以及核酸疫苗[33]等。 母源抗体可通过初乳转移给仔犬,幼犬母源抗体的半衰期是8.5d,多数仔犬的母源抗体在8~12周龄开始减弱,15周龄消失。另外可给犬注射犬瘟热单克隆抗体、犬瘟热免疫血清、免疫球蛋白、干扰素等。当血清中母源抗体下降到1:20以下时较易感,1:100以上时通常不易感,因此血清中和抗体滴度1:100是免疫接种的指示滴度[34]。母源抗体滴度不明的幼犬,一般初免为6周龄,二免为8~9周龄,三免为10~11周龄,以后每年接种一次。 (二)治疗 治疗原则为:对症治疗,控制细菌继发感染,维持体液平衡,增强抵抗力,控制神经症状。良好的护理是治疗成功的关键。治疗CD时一定在尽早大剂量使用高效价免疫血清的同时,进行以防止继发感染为中心的对症治疗与增强机体免疫功能的治疗,对于表现出神经症状的病犬,治疗的意义不大,症状进一步恶化者,可以考虑安乐死。 治疗方法为:干扰素700万IU,肌注,连用5d,犬瘟热病毒单克隆抗体5 mL,肌注,连用3~5d;消炎:使用适宜,广谱抗菌药,可配合抗病毒药物,静注,注意不要长期使用一种抗菌药,适量使用退烧药。输液以5%葡萄糖溶液、乳酸林格氏液为主,配以VC、VB6、ATP、辅酶A,在饮欲、食欲恢复前,保证每天输液量不低于400mL。另外可配合中药治疗如:金银花12g,连翘12g,板蓝根12g,黄柏15g,黄芩12g,水牛角15g,玄参12g,生地12g,知母12g,甘草15g,水煎,1d1剂,分2次经口给予。以上方法连用5d后,观察病犬情况,再根据情况进行治疗。 另一些最新的研究报道如:Alloferon1是从丽蝇体内分离出的活性多肽,体内试验结果表明对犬瘟热病毒感染的小鼠有明显的保护作用,有望成为犬瘟热防治的一种新型药物[35]。口服苯妥英钠与静脉内注射盐酸普鲁卡因联合应用治疗神经型犬瘟热有良好的效果[36]。体内外试验证明利巴韦林(RIB)能够抑制麻疹病毒的复制。EICAR是利巴韦林的类似物,在抑制CDV复制方面的活性强于利巴韦林,也同样均有浓度和时间依赖性[37]。金丝桃素为藤黄科金丝桃属多年生草本植物的提取物,在先毒后药情况下可以有效抑制犬瘟热病毒的增殖。 参考文献(略) |
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