禽流感(Avian influenza，AI)是由A型流感病毒(Avian infnenza virus，AIV)引起的一种禽类的高度接触性传染病，鸡、火鸡、鸭、鹅和鹌鹑等家禽及野鸟、水禽、海鸟等均可感染。A型流感病毒属于正黏病毒科，基因组是负义单股RNA，分为8个片段。根据表面抗原血凝素(hemagglutinin ，HA)和神经氨酸酶(neuraminidase ，NA)的抗原性不同，可将A型流感病毒分成若干亚型，目前，已发现了16种HA和9种NA亚型。A型流感病毒具有宿主特异性，感染禽类并致病的通常是H5、H7和H9亚型。H9N2亚型禽流感病毒最早于1966年从北美的火鸡体内分离得到，1994年开始在中国大陆的家禽中出现，最近几年在经济性家禽中普遍暴发[1]。H9N2亚型虽然为低致病性禽流感病毒(Lowly pathogenic avian influenza virus， LPAIV)，但可造成蛋鸡的产蛋量严重下降，肉鸡和青年鸡的复合型呼吸道疾病和死淘率升高，往往造成严重的经济损失。1999年出现的H9亚型AIV感染人的事件，更是给人类的健康带来了巨大威胁。H9亚型禽流感病毒在经济上和公共卫生上的重要地位，越来越引起人们的广泛关注。与其他病毒性疾病一样，禽流感的防治尚无特别有效的方法，接种疫苗是预防禽流感发生与传播的最有效手段。近年来，随着分子生物学技术的不断发展，为禽流感新型疫苗的开发提供了理论依据和技术手段，除传统的灭活疫苗外，还进行了活载体疫苗、亚单位疫苗和核酸疫苗等方面的探索，本文就近年来H9N2亚型禽流感疫苗的研究现状做一综述。
1 灭活疫苗
灭活全病毒疫苗一般是用甲醛灭活禽流感病毒鸡胚尿囊增殖液，并辅以佐剂制成，有良好的免疫作用。根据需要可制备针对几种不同亚型病毒的多价疫苗。李明义等[2]用A型禽流感病毒A/Ostrich/Denmark/77420/96(LPAIH5N2 )株及A/Chicken/ Shanghai/1/98(H9N2)株分别接种易感鸡胚，收获感染胚液超滤浓缩后经甲醛灭活，加油佐剂混合乳化制成油乳剂灭活疫苗。疫苗接种4周龄SPF鸡，试验表明疫苗安全。取疫苗1羽份接种4周龄SPF鸡进行效力试验，免疫鸡群全部获得保护，对照鸡群全部感染或死亡。经不同免疫剂量测定，证明1羽份疫苗至少含有8个免疫剂量。免疫干扰试验证明两种抗原具有免疫协同作用。
禽流感、新城疫、传染性支气管炎对鸡群危害巨大，且免疫程序相近，为减少接种次数，达到更好的保护效果，多制成联苗进行免疫防控。刘佃章等[3]用本地分离的禽流感病毒H9毒株和新城疫病毒La Sota株经鸡胚增殖，灭活后制成禽流感H9、新城疫二联灭活油佐(乳)剂疫苗，经效力检验和攻毒试验，5日龄白羽肉鸡免疫后15 d，抗体效价可达1∶32以上，并能够保护免疫鸡免受禽流感病毒的自然感染，新城疫病毒的抗体效价也达到较高的水平。2007年1月，洛阳普莱柯生物工程有限公司宣布禽流感(H9N2)、新城疫、传染性支气管炎三联灭活疫苗研制成功，对3万多只鸡的临床试验证实疫苗安全有效。禽流感三联苗不但有效解决了新城疫、传染性支气管炎、禽流感等3种病毒病免疫程序接近，免疫间相互干扰，重复免疫应激等生产应用中的重大问题，而且使用成本仅为单苗相加的50%。灭活疫苗制备工艺简单，免疫保护效果较好，能有效避免禽流感的大规模暴发和流行。
2 基因重组活载体疫苗
重组鸡痘病毒疫苗是一类研究较为深入、具有广阔应用前景的禽用基因工程疫苗，用于构建重组鸡痘病毒的载体一般为鸡痘病毒疫苗株，它们的毒副作用小，安全性高。扩增禽流感病毒HA基因，插入鸡痘病毒载体使其表达HA蛋白，制成基因重组活载体疫苗，抵御禽流感病毒的攻击。陈平等[4]将禽流感病毒H9亚型HA基因克隆插入载体pFG11S中，与禽痘病毒疫苗株(wFPV)共转染鸡成纤维细胞(CEF)得到重组病毒rFPVPsHA，以间接免疫荧光法证实HA基因得到了表达。将该病毒经颈部皮下接种1日龄SPF鸡， 接种后15 d以H9亚型禽流感病毒F株翅静脉攻毒，攻毒后第5天采集泄殖腔棉拭子样品进行病毒分离，发现疫苗组均能很好地抑制排毒，攻毒对照组泄殖腔的排毒率明显高于气管排毒率。陈素娟等[5]应用相同的技术构建了同时表达H5和H9亚型禽流感病毒分离株的血凝素(HA)基因的重组鸡痘病毒，初步动物试验表明， 用该重组鸡痘病毒免疫SPF鸡，免疫后血凝抑制(HI) 抗体监测阳性率均为100%(8/8)；该重组病毒能显著抑制H9亚型AIV滴鼻、点眼后7日龄SPF鸡从气管和泄殖腔排毒，同时也能抵抗H5亚型AIV肌肉注射后对7日龄SPF鸡致死性攻击，保护率均为100 % ，具有一定的应用前景。程坚等[6]构建了共表达H9亚型HA基因和IFNⅡ的重组鸡痘病毒，不仅能显著抑制静脉攻毒后1日龄SPF鸡及含抗FPV母源抗体的商品鸡从泄殖腔排毒，且能减轻单表达HA的重组鸡痘病毒抑制1日龄SPF雏鸡增重的副作用。
3 亚单位疫苗
亚单位疫苗是利用病原微生物表面结构成分制成的不含核酸，能诱导机体产生保护性免疫应答的疫苗。禽流感亚单位疫苗是提取禽流感具有免疫原性的蛋白，加以佐剂制成的。随着重组DNA及分子克隆技术的发展，可以将表面基因连接到载体质粒，然后导入表达系统中，经诱导可获得大量表达的免疫原性蛋白，加入佐剂制成基因工程亚单位疫苗。
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