程艳菊，郭艳红，赵剑平
（容城县农牧局，河北容城071700） 摘 要：猪瘟又称“烂肠瘟”，是由猪瘟病毒引起的猪的一种热性、致死性、高度接触性传染病，对养殖业影响颇大。为了提高猪瘟免疫效果，我们用正向间接血凝试验在亨发猪场对三组在不同日龄注射猪瘟疫苗的仔猪血清进行了检测。结果表明：A组、B 组、C组最高抗体滴度分别为1︰32，1︰64，1︰128。试验中所用猪瘟血凝抗原效价为1︰1024，标准阳性血清效价为1︰2048。
关键词：猪瘟； 抗体；滴度；免疫 近年来猪瘟的流行形式、发病特点、临床症状及病理变化等方面都发生了较大的变化。典型猪瘟病例已逐渐减少，常以非典型猪瘟出现，表现为慢性和非典型化。感染猪瘟病毒的猪，抵抗力降低，尤其是在天气骤变、阴雨潮湿、饲养管理较差、卫生不良、吸血昆虫繁殖旺盛季节，极易并发猪附红细胞体病，造成大批死亡。猪瘟的发生有多种多样的原因，在改善其生物安全管理措施的同时，选择质量良好的疫苗，使用合理的免疫程序以实现有效的免疫，使猪群获得均匀一致的抵抗力无疑是控制猪瘟目前最为可行的措施之一。
近年来，我县规模化养猪场不断增多，饲养量呈逐年上升趋势，广大养殖户普遍重视对猪瘟的防疫。但仔猪免疫猪瘟疫苗时免疫日龄不尽相同，导致免疫效果差异明显。针对以上现状，笔者在2007年8～11月对我县亨发猪场三组不同日龄肌注猪瘟细胞苗的仔猪和各组母猪进行了猪瘟抗体监测，为广大养殖户提供猪瘟适宜免疫日龄，避免免疫空白期，现将试验过程和结果报告如下。
1实验目的 本试验旨在确定猪瘟首次免疫及二免的最佳时间。
2猪场地点 容城县东牛亨发猪场。
3采样与分组
3.1 分组 （按母猪预产期每2头母猪所产自主为一组）
A组：预产期2006年8月6日，母猪号为F218、F106。
B组：预产期 2006年8月15日，母猪号为 F36、F44。
C组：预产期 2006年8月17日，母猪号为 F128、F346。
3.2 疫苗选择 50头份猪瘟细胞苗，生产厂家：乾元浩生物股份有限公司，批号20060392。
3.3 分组注射
A组 进行超前免疫 即所产仔猪先注射猪瘟疫苗两小时以后再吃初乳，每头仔猪肌肉注射1头份；35日龄，进行二免，每头肌肉注射4头份。
B组 20日龄首免,每头仔猪肌肉注射4头份；60日龄二免 ,每头仔猪肌注2头份。
C组 35日龄首免,每头仔猪肌注2头份；60日龄二免 ,每头仔猪肌注2头份。
4确定采样时间 在二免后21天进行采血
A组 2006年10月2日
B组 2006年11月5日
C组 2006年11月12日
5实验地点 容城县农牧局疾病防控中心化验室。
6实验室准备
6.1材料
6.1.1被检血清:按采样时间每头仔猪和各组母猪（用记号笔记下母猪号）耳静脉采血2～5毫升。
6.1.2猪瘟血凝抗原：中国农科院兰州兽医研究所，批号20060408。
6.1.3猪瘟阴性对照血清：中国农科院兰州兽医研究所，批号20060211。
6.1.4猪瘟阳性对照血清：中国农科院兰州兽医研究所，批号20060211。
6.1.5稀释液：中国农科院兰州兽医研究所，批号20060724。
6.1.6本实验所需仪器
6.1.6.1离心机 江苏通宝实验有限公司，800转离心机
6.1.6.2 96孔110°V型医用血凝板
6.1.6.3 微量移液器及取液塑料嘴
6.1.6.4 微量振荡器：常州国华电器有限公司生产，型号：2W-A
6.2方法
6.2.1 备检血清制备
6.2.1.1A组采样21份，母猪样2份；B组采样18份，母猪样2份；C组采样23份，母猪样2份。
6.2.1.2将上述所采血样4000转离心10分钟，取其血清，4℃冰箱保存备用。
6.2.1.3猪瘟正向间接血凝实验：按照《河北省兽医实验室诊断技术培训教材附录》提供的方法。
7结果
7.1 猪瘟正向间接血凝实验结果判定时，只有阴性对照孔、稀释液对照孔均无凝集或仅出现“+”凝集（血球大部分沉于孔底，边缘稍有少量血球悬浮），阳性血清对照孔1～12孔，各孔应出现“++～++++”凝集为合格，（少量血球沉入孔底，大部分血球悬浮于孔内），在对照孔合格的前提下，在观察待检血清各孔，以呈现“++”凝集的最大稀释倍数为该分血清的抗体效价。
7.2 A、B、C三组待检血清猪瘟正向间接血凝检测结果见下表：
备注： 猪瘟血凝抗原效价为 1︰1024； 标准阳性血清效价为 1︰2048。
7.3各组母猪抗体效价
各组母猪抗体效价分别为：
A组母猪号 （F218） 1︰128 ，（F106）1︰256
B组母猪号 （ F36） 1︰256 , (F44)1︰128
C组母猪号 （F128） 1︰128 ,（F346）1︰128
8小结与讨论
8.1对不同日龄仔猪免疫猪瘟的正向间接血凝实验结果表明，A、B、C三组血清最高抗体滴度分别为1︰32，1︰64，1︰128，该猪场三个实验组母猪抗体滴度均在1︰128～1︰256之间。猪瘟抗体水平达到1︰16或1︰16以上的为免疫合格。
8.2 根据以上实验结果，我们可以看出：不同日龄仔猪肌注同一厂家的猪瘟细胞菌苗后免疫效果差异显著。笔者建议，在猪群健康状况良好、母猪抗体水平较高的情况下，猪瘟疫苗应在仔猪断奶后（35日龄）进行首免，60日龄进行二免。此外，我们还应及时检测仔猪母源抗体，通过母源抗体水平的检测制定合理的免疫程序，根据抗体水平适时免疫，避免免疫空白期。为了使仔猪获得较高的母源抗体，建议母猪在产后20～25天进行猪瘟免疫，种公猪每年春秋两季各免疫1次 ，每头猪细胞苗5头份。
8.3 猪瘟抗体检测在预防和控制猪瘟中起了很大的作用，建议规模化猪场应建立猪瘟免疫监测，作为制度定期进行。抗体检测能客观的反映猪群的抗体水平，指导猪场合理科学免疫，还能检查免疫的效果，避免因疫苗质量（如运输、保存不当疫苗效价偏低等）和伪狂犬、蓝耳病等疾病干扰导致猪瘟免疫失败。另外，发病猪场也可用抗体检测来指导猪瘟的紧急免疫，并检查免疫效果，以免盲目重复接种。猪瘟抗体检测已在实践中应用，并取得了很好的效果。猪瘟抗体检测可用猪瘟间接血凝实验，重复效果好，数据准确，可以在基层应用。
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